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08-03 ReverTra Ace ?qPCR RT Kit (Code No.:FSQ-101) 使用说明书科研用 TOYOBO CO., LTD. Life Science Department OSAKA JAPAN 目录 【1】前言.......................................................... 1 【2】产品内容...................................................... 2 【3】其他必需品.................................................... 3 【4】使用方法...................................................... 4 【5】相关操作步骤.................................................. 5 【6】常见问题...................................................... 8 【7】相关产品...................................................... 9 【注意】 本试剂盒中所含的试剂均为科研用试剂。请勿作为诊断、临床试剂用。在使用时, 请严格遵守实验室的一般注意事项,适当使用保护用品,安全操作。【 1 】前言 ReverTra Ace ? qPCR RT Kit 是基于制作 Realtime PCR 用模板 cDNA 的目的而开发的高效率且使用简单方便的逆转录反应试剂盒。本产品采用了本公司高性能逆转录酶 ReverTra Ace ? 和作为 Realtime PCR 目标的短链 cDNA 合成的最优化反应成分,能够高效率地合成适用于 Realtime PCR 的 cDNA 模板。此外,本产品简化了试剂盒的构成并且拥有快速的反应操作的特点,能够在短时间内简单方便地进行 cDNA 合成。*本产品的试剂盒内没有添附 Realtime PCR 试剂。关于 Realtime PCR 产品,推荐使用本公司的 Realtime PCR 用试剂 Realtime PCR Master Mix 系列。(详情请参考[7] 相关产品的内容)。◆本产品的特征◆ 1. 对应各种不同长度目标片段的高效率逆转录 ReverTra Ace ? qPCR RT Kit 采用了最适合于 Realtime PCR 用 cDNA 合成的反应缓冲液,和以最恰当比例混合的 Primer 混合液,对于各种不同长度的目标片段,不用摸索条件就能够进行高效率的逆转录反应。 2. 反应时间短、操作简单方便 ReverTra Ace ? qPCR RT Kit 只需要 15 分钟的逆转录反应,就能够对各种长度的目标片段进行高效率的逆转录反应。此外,在 Realtime PCR 的过程中, 会自动清除抑制反应的残留 RNA ,无须另外进行 RNase H 处理(专利申请中)。 3. 提高了与 Realtime PCR 试剂的兼容性 ReverTra Ace ? qPCR RT Kit 采用了对于 Realtime PCR 反应体系的影响程度最小的成分,即使在 PCR 反应中添加了最多 20% 液量的逆转录反应液,也能表现出良好的反应曲线(已通过使用本公司的 Realtime PCR Master Mix 确认) 。最适合用于表达量较少的 mRNA 的高灵敏度检测。 .cn 1 东洋纺(上海)生物科技有限公司【 2 】产品内容?本产品包含以下几种试剂,每 10 μ l 反应体系可使用 200 次。所有试剂请均保存在-20°C 条件下。试剂名保存条件容量 5 × RT Buffer (Reaction Buffer + MgCl 2 + dNTPs) -20°C 400 μ l Enzyme Mix (ReverTra Ace ? reverse transcriptase + RNase Inhibitor) -20°C 100 μ l Primer Mix (Random Primer + Oligo(dT) Primer) -20°C 100 μ l Nuclease-free Water -20°C 1000 μ l x2 5 ×RT Buffer 含有反应缓冲液、 MgCl 2 、 dNTPs 等 5 倍浓度的逆转录反应液 Buffer 。溶解时,可能会出现白色沉淀,但不影响其品质。请使用振荡器等仪器使其混合均匀, 等完全溶解之后再使用。 Enzyme