液相色谱仪.doc

定量分析色谱法不仅是一种分离方法,而且通过被分离组分分别进入检测器,能精确测的各组分在样品中的含量。定性分析:通常用与标准样比较保留时间进行定性,即保留时间相同可能是同样的组分;保留时间不同,肯定不是同样的组分。液相色谱定量分析的基本原理定量分析是在定性分析的基础上,需要纯物质作为标准样品。液相色谱的定量是相对的定量方法,即:由已知的标准样品推算出被测样品的量。液相色谱法定量的依据:被测组分的量(W)与响应值(A)(峰高或峰面积)成正比,W=f×A。定量校正因子(f):是定量计算公式的比例常数,其物理意义时单位响应值(峰面积)所代表的被测组分的量。由已知标准样品的量和其响应值可以求得定量校正因子。测定未知组分的响应值,通过定量校正因子即可求得该组分的量。定量分析常用术语:样品(sample)含有带测物,供色谱分析的溶液。分为标样和未知样。标样(standard)浓度已知的纯品。未知样(unknow)浓度待测的混合物。样品量(sampleweight)待测样品的原始称样量。稀释度(dilution)未知样的稀释倍数。ponance)欲做定量分析的色谱峰,即含量未知的被测物。组分的量(amount)被测物质的含量(或浓度)。积分(integerity)由计算机对色谱峰进行的峰面积测量的计算过程。校正曲线(calibrationcurve)组分含量对响应值的线性曲线,由已知量的标准物建立,用于测定待测物的未知含量。常用的定量方法标准曲线法,分为外标法和内标法。外标法在液相色谱中用的最多。内标法准确但是麻烦,在标准方法中用的最多。外标法用被测化合物的纯品作为标准样品,配制成一系列的已知浓度的标样。注入色谱柱的到其响应值(峰面积)。在一定范围内,标样的浓度与响应值之间存在较好的线性关系,即W=f×A,制成标准曲线。在完全相同的实验条件下,注入未知样品,得到欲测组分的响应值。根据已知的系数f,即可求出欲测组分的浓度。外标法的优点:操作、计算简单,是一种常用的定量方法。无需各组分都被检出、洗脱。