基因工程-6章 重组dna导入受体细胞ppt课件.ppt

12020/10/27载体与目的基因连接后,体系中可能存在下列分子:  ***段   ,这些分子同时被转移到宿主细胞内。未连接的分子即使被细菌摄取,寄主的酶可降解这些DN***段。自连的载体和错误插入的重组质粒可以进入宿主细胞进行正常的复制3重组DNA技术操作过程可形象归纳为分分离目的基因切限制酶切目的基因与载体接拼接重组体转转入受体菌筛筛选重组体4第六章重组DNA导入受体细胞一、受体细胞二、选择受体细胞的基本原则三、重组DNA导入受体细胞的方法52020/10/27一、受体细胞受体细胞(receptorcell)又称为宿主细胞(hostcell),是指能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞。petence)是指细菌吸收外源DNA的生理状态。petencecell)是指具有接受外源DNA能力的细胞。62020/10/27基因工程常用的受体细胞有:大肠杆菌枯草杆菌土壤农杆菌酵母菌植物细胞动物细胞7大肠杆菌81、原核生物细胞的优点①大部分原核生物细胞没有纤维素组成的坚硬细胞壁,便于外源DNA的进入。②没有核膜,染色体DNA没有固定结合的蛋白质,这为外源DNA与裸露的染色体DNA重组减少了麻烦。③基因组简单,不含线粒体和质体基因组,便于对引入的外源基因进行遗传分析。④原核生物多数为单细胞生物,容易获得一致性的实验材料,并且培养简单,繁殖迅速,实验周期短,重复实验快。92020/10/27原核生物细胞表达真核生物基因存在的缺点:①原核生物细胞不具备真核生物的蛋白质折叠复性系统,即使许多真核生物基因得以表达,得到的也多是无特异性空间结构的多肽链。②原核生物细胞缺乏真核生物的蛋白质加工系统,而许多真核生物蛋白质的生物活性正是依赖于其侧链的糖基化或磷酸化等修饰作用。③原核生物细胞内源性蛋白酶易降解空间构象不正确的异源蛋白,造成表达产物不稳定等。102020/10/27