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实验四酶的特性实验.docx


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说明:本实验由四个小实验组成,其中第一个实验(酶的专一性)必做,其他三个小实验选做(至少做一个)写实验报告时,可以只写需要做的实验内容!实验四酶的特性实验一、实验目的酶是生物催化剂,生物体内化学反应基本上都是在酶的催化下进行的。通过本实验了解酶催化的特异性、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响,对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。二、实验内容本实验由酶的专一性实验、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响4个小实验组成。(一)酶的专一性1、实验原理本实验以唾液淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用为例,来说明酶的专一性。淀粉和蔗糖无还原性,唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性二糖的麦芽糖,但不能催化蔗糖的水解。用班氏试剂检查糖的还原性。班氏试剂为碱性硫酸铜,能氧化具还原性的糖,生成砖红色沉淀氧化亚铜。2、材料、仪器与试剂(1)材料:新鲜配制的唾液及其稀释液(2)仪器:恒温水浴;沸水浴;试管及试管架;(3)试剂:2%蔗糖溶液;%%淀粉溶液;班氏试剂。3、实验操作(1)稀释唾液的制备①唾液的获取用一次性杯取一定量的饮用水,漱口以清洁口腔,然后在嘴中含10-20ml饮用水,轻漱2min左右时间,即可获得唾液的原液,内含唾液淀粉酶。②不同稀释度唾液的制备(用大试管)本实验需制备1:1、1:5、1:20、1:50、1:200等五个不同浓度的稀释唾液。举例说明:1:5指的是稀释了5倍的唾液,制备方法为1份原液+4份蒸馏水。1:20指的是稀释了20倍的唾液,制备方法为1份1:5的稀释液+3分蒸馏水。(2)唾液淀粉酶最佳稀释度的确定(严格按表1添加顺序做实验,用小试管做实验)表1唾液淀粉酶稀释度的确定管号1(1:1)2(1:5)3(1:20)4(1:50)5(1:200)%淀粉溶液(滴)44444稀释唾液(ml)1111137℃恒温水浴中保温5分钟班氏试剂(ml)11111沸水浴2~3分钟实验结果(2)%淀粉溶液(滴)4-4-4-2%蔗糖溶液(滴)-4-4-4最佳稀释度唾液(ml)--11――煮沸过的最佳稀释度唾液(ml)----11蒸馏水(ml)11----37℃恒温水浴中保温5分钟班氏试剂(ml)111111沸水浴2~3分钟实验结果(二)温度对酶活力的影响1、实验原理酶的催化作用受温度的影响。在最适温度下,酶的反应速度最高。淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色,糊精按其分子的大小,遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色,麦芽糖遇碘也不呈色,在不同温度下,淀粉被唾液淀粉酶水的程度可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。2、材料、仪器与试剂(1)材料:新鲜配制的唾液及其稀释液(2)仪器:试管及试管架;恒温水浴;冰浴;沸水浴;(3)试剂:%%淀粉溶液;KI-I2碘溶液;3、实验操作取4支干燥的试管,编号后按下表加入试剂:%淀粉溶液(ml)(ml)11煮沸过的稀释唾液(ml)1实验结果摇匀后,将1、3号试管放入37℃恒温水浴中,2号试管放入冰水中。10分钟后1、2、3管均取出(将2号内液体分两半),用KI-I2溶液来

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  • 时间2020-11-04