高速逆流色谱法原理与应用.ppt

高速逆流色谱法
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高速逆流色谱（HSCCC）
High-speed countercurrent chromatography
建立在一种特殊的流体动力学平衡基础上，利用螺旋管的高速行星式运动产生的不对称离心力场，实现两相溶剂体系的充分保留和有效混合及分配，从而实现物质在两相溶剂中高效分离。
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二、基本原理
现代逆流色谱仪器体系：
流体静力学平衡体系
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流体动力学平衡体系（HSCCC体系）
仪器的两个特征：
a 有一个或多个缠绕有多层聚四***乙烯管的线轴；
b 没有旋转密封接头，有一个安装有两个旋转轴的齿轮传动装置，能产生一个可变的离心力场。
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通过公转、自转（同步行星式运动）产生的二维力场，保留两相中的其中一相作为固定相；
离心力场的强度和方向都可以变化；
倾析和混合交替出现，两相液体在螺旋管柱中总是处在接触状态，没有死体积存在；
流体动力学CCC中压力小，固定相保留值大。
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高速逆流色谱正是利用了两相的这种单向性分布特征，在高的螺旋管转动速下，如果从尾端送入首端相，它将穿过尾端相而移向首端，同样，如果从首端相送入尾相，它将穿过首端相而移向螺旋管的尾端。
分离时，在螺旋管内首先注入其中的一相(固定相)，然后从合适的一端泵入移动相，让它载着样品在螺旋管中无限次的分配。仪器转速越快，固定相保留越多，分离效果越好，且大大地提高了分离速度，故称高速逆流色谱。
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高速逆流色谱与高效液相色谱比较
HPLC和HSCCC的固定相体积不同  理论塔板数的工作范围不同；
到目前为止，逆流色谱的最高分离效率低于5000理论塔板数。
HSCCC中溶质可以进入并接触到液态固定相的整个体积；HPLC中，溶质不能进入到固体支撑体内部，仅涂渍在表面的有机层的液-固界面  HPLC有过载现象；
HSCCC进样体积可达到柱体积的20%，广泛用于制备性分离。
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 HSCCC与HPLC是互补的分离技术
参数
HSCCC
HPLC
固定相
液体
固体
机理
液-液分配（简单）
分配、吸附、离子交换、体积排阻等（复杂）
溶质与固定相作用
与液体固定相的整个体积相接触
在固定相与固体支撑体的界面相互作用
上样量
高
中等
分离效率
低
高
操作
容易
复杂
费用
便宜
昂贵
危险性
高速运转产生机械故障
安全
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结构组成
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