β-葡萄糖苷酶转化葡萄糖制备低聚龙胆糖研究.pdf

江南大学
硕士学位论文
β-葡萄糖苷酶转化葡萄糖制备低聚龙胆糖的研究
姓名:刘玲玲
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:吴敬
20090601
摘要一葡萄糖苷酶的基因坛,,是高效的双歧杆菌增飧髄‘ぶ诙嘤帕嫉某纠砉δ埽谐∏熬肮憷ā5途哿ㄌ堑难芯亢陀τ闷鸩酵恚发腱臁阂祷途哿ㄌ侵饕J峭ü阜ㄉ壳肮谌晕茨艽蠊婺9ひ化本论义系统地研究了低聚龙胆糖的酶法生产工艺,以高浓度的葡萄糖为原料,利用岛活性。睫组咸烟擒彰缸L牵嚎虾退鹾系玫降途哿ㄌ墙俳蟹掷氪炕竦酶叽慷的低聚龙胆糖成品。主要研究内容如下:ê谇诒铣嘟湍斜泶铮晒菇嘶蚬こ叹,表达产物经、鉴定具有转苷活性,可作为低聚龙胆糖的生产用酶。疾旎蚬こ叹鶮的摇瓶发酵情况,确定适宜的发酵条件:生长阶段接种量%,甘油初始浓度∥.,温度℃,三角瓶诱导培养基装液量,酶活可达到痬1狙芯课5途哿糖大规模生产奠定了孥实的基础。蚬こ叹鶮发酵获得咸烟擒彰复置敢汉螅糜谧;咸烟侵备低聚龙胆糖,优化其反应条件。确定最佳条件:底物浓度为%,反应,温度℃,每克葡萄糖加酶砑/腒十,转化周期为途哿糖浓度为∥醪窖芯棵阜从Σ镏械途哿ㄌ堑姆掷氪炕1冉辖峋А⑸字街址掷敕椒ǎ结果表明色谱柱分离法效果较好,最佳分离条件是利用阳离子树脂刂品离柱柱高,内径,分离温度℃,进料量途哿ㄌ牵运为洗脱剂,/南赐蚜魉伲墒沟途哿ㄌ呛看锏ィ厥章饰ィ有望进一步分离得到更为理想的结果,使生产高纯度低聚龙胆糖成为可能。关键词:低聚龙胆糖;咸烟擒彰福槐泶铮环⒔吞跫呕幻缸;环掷氪炕摘要/痯/,
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耍盔丛墨睿河迎罩绎鱼固幽迦旦槽棠叟园叠桎关于论文使用授权的说明独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含本人为获得江南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。.本学位论文作者完全了解江南大学有关保留、使用学位论文的规定:江南大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文,并且本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。保密的学位论文在解密后也遵守此规定。签期:导师签名:名:日
第一章绪论低聚龙胆糖功能性低聚糖面狭窄,主要以乳饮料、奶粉为主,少量用于糖果、酒类、保健品掣。但是总的来说,功能性低聚糖足⋯龅ヌ蔷擒占佣傻牡投染酆咸恰綢】。通常包括低聚异麦芽糖、低聚果糖、低聚半乳糖、低聚乳果糖、偶合糖、低聚木糖、低聚壳聚糖、低聚龙胍糖、棉О辍⑺仗堑取W匀唤缰薪鲈谏偈钢质澄镏泻泄δ苄缘途厶恰@纾洋葱、大蒜、一壳、人门冬、菊苣根等。功能性低聚撕被称为双歧因子,具有良好的双歧杆菌增殖作用和整肠功能,还可以抑制内毒素,调顺ξ腹δ埽せ蠲庖摺⒖顾ダ稀⒖怪琢觥⒔档脱G宓ü檀肌⒔档脱Q等【。从物理质角度,功能性低聚糖不是高分子物质,对被添加食品的组织结构和物理性质不会产,卜较人影响,并且不改变食品的可食性,是极具优势的食品添加剂,所以引起众多科研者的,⑿巳ぁ掘小俊国际市场一卜,卜臼强7⒌途厶遣牧虾脱芯科涔δ苄阅茏钤缫彩亲罘⒋锏墓遥在年代初就有多家公司参与开发和研究功能性低聚糖,并形成了年产Γ喽值生产规模,年销售额可达亿!9δ苄缘途厶且约坝泄厥称返纳谌毡疽丫形成了一个突出的市场。近年来,美国、德国、英国等国家也开始投入巨资对功能性低聚糖进行研究生产【俊我国研究功能性低聚糖从年代开始起步,经过“九五”的发展,我国的功能性低聚糖生产初具规模,有余家单位少数研究成果转让投产。目前工业化商品有异麦芽低聚糖、低聚果糖、低聚半乳糖、大豆低聚糖、水苏糖等。生产总量约Γ郑饕产品为低聚异麦芽糖【俊K淙还诙怨δ苄缘途厶堑难芯科鸩酵恚ひ祷飞伲τ本领域发展较快,并已引起众多研究者的关注,所以功能性低聚糖必将以其独特性能和功效而成为我国食品添加剂研究领域的重点。低聚龙胆糖是一类由葡萄糖以,擒占岷隙纬傻男滦凸δ苄缘途厶,结构式如图所示:图低聚龙胆糖的结构式低聚龙胆糖名称来源于龙胆属的学名,包括龙胆二糖,少量的三糖和四糖。自然界存在天然的低聚龙胆糖,例如龙胆属的茎和根含有低聚龙胆糖,提炼出可作为苦味健胃剂;藏红花的色素中含有龙胆二糖的残基;蜂蜜,海藻类的多糖中含有低聚龙胆糖结构。甀
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