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微生物论文微生物及其代谢物快速检测技术的研究摘要我们的日常生活与食品微生物密切相关,例如食品发酵、食品***、食品中毒属三个类群的微生物。食品微生物在许多食品的上产中起着至关重要的作用, 其中细菌和真菌是导致食品***变质的主要元凶,食品中微生物的检测技术和自动化的发展,时刻影响着我们的生活。食品微生物检测技术很多,比较传统的方法是依靠培养基进行培养、分离及生化鉴定。随着科学技术的发展和科研水平的不断日高,微生物的快速检测技术越来越受到众多科研人员的青睐,成为科研的微生物论文 2 热点。关键词: 食品安全;微生物;快速检测技术微生物快速检测法的国内外研究现状微生物快速检测技术在在国内外成为愈来愈热的话题好人研究课题,目前国内外的快速检测方法主要有以下几种。 PCR PCR 技术是由 Kleppe [3] 等人在 1971 年首先提出的。该方法通过对人工难以培养的微生物相应 DNA 片段的扩增,检测扩增产物含量,从而快速地对食品中致病菌含量进行检测。检测时,首先在高温下(95 ℃)使得蛋白质变性,DNA 双链变成单链;再迅速降温(55 ℃),每条 DNA 单链退火,这就是所谓的热循环。之后温度重新上升到 95℃,开始新的循环。经一套扩增循环(21 到731 次) 将一个单分子DNA 扩增到 10分子。整个过程可以在 1h内通过自动热量循环器完成。理论上, 只要样品中含有一分子沙门氏菌的 DNA ,通过 PCR 技术完全可以在短时间内检测到。这种测定方法的优点是测定结果迅速,灵敏度和特异性高,检测成本低。 ELISA 抗原—抗体反应法是测定特异性致病菌及其产生***最常用的方法。 ELIS A 是利用抗原和抗体之间的反应,在临床医学领域的许多方面都有应用。抗体在抗血清中可以是单克隆抗体,也可以是多克隆抗体。这两种抗体在 ELISA 技术中对于沙门氏菌、大肠杆菌 O157:H7 、李斯特菌等血清型细菌有很好的检测效果。检测时首先将抗体吸附到固体载体上,然后再加富集培养物,使抗体将样品中所有目的抗原结合到固体载体上。实际中常使用一种夹心模式,在该模式中,先将第二个酶标抗体加入样品中,然后加入一种能与第二个酶标抗体发生阳性颜色反应的反应底物。如果样品中没有目的抗原,酶标抗体就无法结合,也就不会发生颜色反应,反之就可以认为该样品呈阳性。 (DEFT) 这是一种能迅速且直接测定样品中微生物负荷量的生物化学检测法。最初英国科学家是为了对牛奶样品进行检测而开发设计,目前该方法已经应用到乳制品、肉微生物论文 3 类制品、饮料、水和污水等物质的检测中。该项检测技术需要使用膜过滤技术和表面荧光显微镜,将样品进行预培养后,利用 DEFT 计数。该项技术能在 24h 内预测 5℃和11℃下保存的巴氏杀菌乳的质量是否一致。每个样品的检测时间约 25min ,费用较低。 biosensor 生物感应器,既可以辨认一个分子的信号,也可以辨认大量分子的信号。整个细胞都可以用作生物感应器。在应用微生物领域游乐广阔的发展前景,检测对象包括***( 葡萄球菌肠***、海豚***、贝类***等) 、特定的致病菌( 例如沙门氏菌、葡萄球菌、大肠杆菌 157:H7 等)。其基本原理虽简单,但在实际应用中需要许多仪器共同完成。近几年来