电子显微镜样品制备与观察电子显微镜样品制备.docx

电子显微镜样品制备与观察
河北大学生命科学学院
主要内容
*电子显微镜的使用与生物样品超微结构 观察
糅样品的取材与固定 樺样品的渗透与包埋 樺修快与支持膜的制备 樺玻璃刀的制作与超薄切片 樺电子染色
一、样品的取材与固定
y）实验目的
1掌握电镜样品取材的方法与要求 2掌握电镜样品的固定方法与要求
（二）实验原理
（见原理部分）
（三）实验材料 小白鼠肝脏（等）
（四）实验方法
1动物麻醉将小白鼠放入烧杯，放入一蘸 有***仿的脱脂棉球，用培养皿盖住烧杯 口，纟勺3〜5min后小白鼠被麻醉；
2解剖分割 迅速解剖，取出肝脏，在硬纸 小块，迅速投入准备号的固定液；
%戊二醛0~4°C固定仆2h （固 定液需提前准备号）；
M磷酸缓冲液漂洗3次，每次
5 〜10min,0 〜4°C；
5后固定1%餓酸固定1〜2h, 0〜4°C；
M磷酸缓冲液漂洗3次，每次
5 〜10min,0 〜4°C；
7脱水30%乙醇—50%乙醇—70%乙醇,
0〜4°C,每步5〜10min；
8保存70%乙醇0〜4弋保存。
（五）实验要求
1用具干燥；
2取材快、准、小、轻；
3餓酸有毒，需在通风厨中进行，含餓酸
I的废液放入指定容器；
4每人固定2〜3块样品；
5在固定的过程中要不断震动样品管。
二、样品的渗透与包埋
（一） 实验目的
掌握超薄切片样品渗透与包埋的方法
（二） 实验原理
见理论部分 H q
（三） 实验材料 上次保存的材料
（四）实验方法
1脱水85%乙醇—95%乙醇—100%乙醇 ->100%乙醇，每步5-10min；
2置换 ***—***,每步5-10min ；
B渗透1/2***+1/2环氧树脂1~4h； ■
4包埋先将包埋模块加满环氧树脂，再将
渗透过的材料用牙签挑到包埋模块尖端 部分，并在其中渗透3~4h；
5 聚合 加热37°C -> 45°C — 60°C,
各 12h。