PCR实验室设计及建设要求.doc

PCR实验室设计及建设要求.docPCR实验室设计及建设要求
PCR实验指的是基因扩增实验,其特点是能将微量的DNA大幅增加，是分
子生物学研究和实验的常规方法，PCR实验室广泛应用于生物学各个领域，例
如：乙型肝炎
艾滋病检测，癌基因的检测和诊断，个体识别，DNA
指纹，亲子鉴定及法医物证等等。SLD中检实验室技术就PCR实验室设计和建 设要求逐一给大家解释:
PCR实验室布局
PCR实验室原则上分为：①试剂准备区；②样品制备区；③扩增区；④ 扩增产物分析区，共四个单独的工作区域。并设有专用走廊,各工作区域应设缓 冲间，工作区与缓冲间宜安装连锁装置。
不同功能的工作区应是分隔独立的，各工作区有明显的标志，不能直通, 如果紧密连接，需安装物品传递窗。
®试剂准备区和样品制备区为扩增前区；
扩增区和扩增产物分析区为为扩增后区，即从：试剂准备区——样品制 备区——PCR扩增室——产物分析室,不得逆向流动。
实验室的气流也应从扩增前区流向扩增后区,不得逆向流动。
各工作区的顶部应该安装紫外灯，紫外灯波长一般为254mm,配置要求 为每20耐一支40W的紫外灯。
实验室各区功能及主要设备
试剂准备区：
®主要进行试齐啲制备，分装和主反应混合液的制备。试剂盒用于样品制 作的材料应直接运送至该区域。
试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的试剂。
本区主要设备有冰箱，天平，离心机，加样器，振荡器等。
本区对气流压力的控制,并没有严格的要求,—般为+ 10Pao
样品制备区：
®主要进行样品的保存，核酸提取，贮存及其加入至扩增反应管和测定
DNA的合成。
本区主要设备有冰箱，生物安全柜，离心机，加样器，振荡器等。
本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为正压，以避免从邻近区进入 本区的气溶胶污染，压力一般设计为+ 10Pao
扩增区：
®主要进行DNA扩增项目。
已制备的DNA模板（来自样品制备区）的加入和主反应混合液（来自试剂
准备区）制备成反应混合液等也可在本区内进行。
本区主要设备有：冰箱，加样器，离心'机，扩增仪等。
本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为负压，以避免气溶从本区漏 出，压力一般设计为-25Pao
扩增产物分析区：
®主要进行扩增产物的测定。
②本区主要设备有加样器,洗板机、酶标仪和水浴箱等。
③本区的压力梯度的要求为：相对于邻近区域为负压，以避免扩增产物从 本区扩散至其它区域，压力一般设计为・25Pa。
三、PCR实验室通风系统及压力控制
①各区域之间应具备单间的实验工艺流、气流、物流与