Interleukin23基因在毕赤酵母中的诱导表达.pdf

河北医科大学
硕士学位论文
Interleukin23基因在毕赤酵母中的诱导表达
姓名:王海娟
申请学位级别:硕士
专业:免疫学
指导教师:魏林
20090301
基因在毕赤酵母中的诱导表达胞因子——白介素.,在近期已经成为细胞因子研究中的要背景:。,在记忆性馨拖赴姆只驮鲋彻讨衅鹬匾W饔谩它还是连接固有免疫应答和适应性免疫应答的桥梁。已有研究证实白介素一与几类炎性疾病的发生密切相关,比如类风湿性关节炎、肠炎、幽门杆菌引起的胃炎、牛皮癣、银屑病等。。此外,。目的:,。方法:、转化、筛选、。结果:通过晒ò捉樗兀牧礁鲅腔连接,并在两亚基连接处添加有由鋈嵝园被酸构成的连接子。将含有克隆至分泌型表达载体狝。获得的阳性克隆,使用兔抗豢梗摘中文摘要
检测,发现在诱导的上清中仅在诱导的两个时间点中能检测到位置的条带。而沉淀中蟮氖奔涞阒芯杉觳獾缴倭勘泶铩结论:成功构建了白介素,。。关键词:白介素一;毕氏酵母;克隆;质粒;表达行中文摘要
琾,,一,琲.·,甀琲琺....篒一琾:籄.,:
;:籔;..一,,
一繇删翩擗‰彬二一领锄研究生繇蒯,一引刖日导师签章:扳辛≥肋罗年吕┤河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺研究生学位论文独创性声明本学位论文在导师蛑傅夹∽的指导下,由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,承担相应的法律责任。本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。
基因在毕赤酵母中的诱导表达以及病理条件下免疫系统的激活等方面发挥着独特的生物学作用。当有病原感染时,感染部位的巨噬细胞和树突状细胞会迅速释放一,【俊9ヒ恢比衔猅细胞分化后分为蚑谱系,而的发现则促进了第三种谱系细胞的发现一化发育、增殖及炎症反应的调节起重要作用的细胞因子。,,.与自身免疫性疾病、感染性疾病、传染病以及恶性肿瘤等疾病发生、点,因此,,,并进行了诱导表达,获得纯蛋白,【,,又不同于.。,是对多种免疫细胞的分发展过程中的作用以及作用机制的研究都是极受关注的热础。研究论文刖舌瘛■‘
材料与方法材料柿:途瓵、甀1臼笛槭夜菇ǎ淮蟪Ω菌、1臼笛槭冶4妗限制性内切酶酶均为公司。用肝狽公司。饕I约夯厥帐约梁泄河谏虾I锕こ坦荆锖铣伞测序均由上海生物工程公司完成。抗生素为公司产品,氨苄青霉素购于北京赛百盛生物工程公司,.猄公司分装,北京赛百盛生物其它化学药品为上海生化试剂公细菌培养及质粒抽提主要试剂:配方浞质粒樘崾约瓺重组工具酶龋琍用司和尽研究论文
溶液过滤灭菌后,保存溶液椅卤4溶液姹4冰乙酸酵母培养主要试剂还顺蚋哐姑鹁患热可以使谒型耆芙生物素/还顺菌顺蚋哐姑鹁琌过滤除菌葡萄糖.::%:。戎埽顺%:研究论文—.猦/甮//:
的甋芙獾公升的水中,过滤除菌,或高压灭菌顺蚋哐姑鹁.,高压灭菌绻涔体平板则添,高压灭菌螅砑觢H粜枰L砑覼蚶淙粗羖孀笥沂碧砑.,同时若有抗性,则需姹芄獗4妗,高压灭菌螅砹,同时若有抗性,则需姹芄獗4妗灭菌水,:哐姑鹁,冷却到℃左右时添加E渲乒烫迤桨时,在第一步的水中加研究论文冷却到℃左右时添加/,,/.,.琹:。