片剂微生物限度检测方法验证试验报告.doc

微生物限度检测方法验证试验报告
一、 　目的：确认供试品的抑菌活性及测定方法的可靠性. 　 　
二、　 内容：细菌、霉菌及酵母菌数测定(即:对五株阳性对照实菌株的回收逐一进行验证)。
三、 菌种：枯草芽孢杆菌【CＭＣC(Ｂ）63501】、金黄色葡萄球菌【CＭCＣ（B）26０03】、大肠埃希菌【CMCC（F）441０2】、白色念珠菌【CＭＣC(Ｆ)９8０0１】、
黑曲霉菌【CMCC(Ｆ）98003】.
四、 　方法： 常规法( );培养基稀释法(　 );薄膜法( ）；综合法（ )。依据《中国药典２０05年版》二部微生物限度检查方法验证实验。
　
五、 方法验证:细菌、霉菌及酵母菌数测定，进行三次独立实验 ，每次平行实验回收率为7０%以上。
六、 实　　 验: 　
(1）菌 　液 组 测定所加的试验菌数.
(2）供试品对照组 　取1ｍ供试液注入平皿中，立即倾入营养琼脂培　养基,做两个平板，按平板菌落计数方法测定其菌落数。
（3）试 验 组 平皿法计数,取供试品10g（ｍｌ），加入ＰH７．0无菌***化钠—蛋白胨缓冲液至10０mｌ（1：１0）,、1mｌ试验菌液（５0~１00cｆu/ml） 分别注入平皿中，立即倾入营养琼脂培养基，每株菌做两个平板，按平板菌落计数方法测定其菌落数。
（4)稀释剂对照组 试验时，可用相应的稀释剂替代供试品，加入1mｌ试验菌（50~１00ｃfu/ｍl），立即倾入营养琼脂培养基,每株菌
做两个平板，按平板菌落计数方法测定其菌落数。
七　、结 　 论: 　通过方法学验证实验证明, 　　 　 　 采用常规法（）；培养基稀释法（)；薄膜法(）；综合法（），对5株阳性代表
菌株回收率均为7０%以上。该方法适用于 　 　　 　 　 　 　 微生物限度检查
复核人： 　 　 　 试验人：
试验记录(１)
批号: 　 　 　 　 验证日期：
试验组及接种量

(1） 菌 　 液 组
（菌液1ｍｌ / 皿）
(2）供试品（稀释剂）对照组
　
（1ml / 皿)
(3) 试 　　验　 组

【供试液（稀释剂)1ml＋菌液1mｌ ／ 皿】
验证菌及稀释倍数
大肠埃希菌
10-
金黄色葡萄球菌
1０—
枯草芽孢杆菌
１０-
白色念珠菌
10－
黑曲霉菌
１0-
细　 菌
霉 菌
大肠埃希菌
10－
金黄色葡萄球菌
10-
枯草芽孢杆菌
10—
白色念珠菌
10-
黑曲霉菌
1０－
培养时间及温度
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小时
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菌落数