清远市产学研结合科技创新平台建设可行性报告(参考提纲).doc

清远市产学研结合科技创新平台建设可行性报告(参考提纲).doc黑山羊水疱性疫病防控技术研究与推广
可行性报告
—、立项依据
(-)目的意义
黑山羊作为优质肉羊品种正在受到人们的重视。清远黑山羊是我 市重点打造的清远农产品“四张名片”之一，而且建立完善的黑山羊疫 病防控技术是推动广东草地畜牧业产业发展的基础。目前广东省牛羊 养殖产业发展处于起步和快速发阶段，但特点是主要以农村小规模养 殖为主，养殖水平低，牛羊疫病频发，严重制约了产业的发展。在羊 病防控方面，水疱性疫病传染性强、死亡率高、危害大的重大疫病， 主要常见的有口蹄疫、小反刍兽疫、羊痘、传染性脓疱、蓝舌病等。 还有其它如：恶性卡他热、水疱性口炎等传染病少见或被消灭或国内 尚未发生。
本项目主要针对困挠本地区山羊养殖业所面临的主要疫病问题 开快速检测鉴别检测技术研究，主要以危害大、临床易混淆、引起牛 羊出现水疱性特征的传染病为研究对象，开展快速鉴别诊断为研究， 病原包括口蹄疫、小反刍兽疫、羊痘、传染性脓疱、蓝舌病，建立快 速鉴别方法，并在实验室和临床开展应用和防控示范。项目对于黑山 羊疫病的及时发现、诊断和采取相应防控措施具有重要意义。通过建 立鉴别诊断技术、临床综合防控、防控示范点建设、防疫人员培训等， 为我省牛羊养殖的健康发展提供障。
（二）国内外现状和发展趋势
口蹄疫是由小核酸病毒科的口蹄疫病毒引起的偶蹄动物的急性、 热性传染病，特征是口腔粘膜、蹄部及乳房皮肤发生水疱和溃烂。主 要发生于猪，但近年来猪群中流行的
0型缅甸株、A型均可以感染 牛羊，所以对牛羊养殖威胁巨大。发病率最高100% ,死亡率依继发 感染、管理等不同在1 %-20%不等。
小反刍兽疫是由副粘病毒科、麻疹病毒属中的小反刍兽疫病毒所 引起的小反刍兽的一种急性高度接触性传染病，以眼、鼻有浆性分泌 物、溃疡和坏死性口炎、肺炎及腹泻为特征，山羊最易感，绵羊次之， 牛可感染但不发病，猪呈亚临床感染。该病之前主要在西非、南亚、 西亚流行，近年传入我国，并迅速传遍全国，危害巨大。发病率可达 100% ,严重暴发期致死率为100%。
传染性脓疱又称口疮，是由痘病毒科副痘病毒属的传染性脓疱病 毒引起羊、牛等动物和人的一种急性接触性传染病，其特征是口、唇 等处皮肤与粘膜形成丘疹、脓疱、溃疡和结成疣状厚痂。敏感羊群发 病毒率最高可达90% ,死亡率可达50%0
羊痘是由痘病毒科病毒引起的绵羊或山羊的一种急性、热性、接 触性传染病，以体表无毛或少毛处皮肤和黏膜发生痘疹为特征，绵羊、 山羊易感。在体表、尾根部出现痘疹或脓疱易与口疮、口蹄疫等易混 淆。羊只引种运输后易发，在新疫区发病率和死亡率均较高。
蓝舌病是由呼肠病毒科、环状病毒性中的蓝舌病病毒引起反刍动 物的一种严重传染病。以口腔、鼻腔和胃肠道黏膜发生溃疡性炎症变 化为特征。主要通过吸血昆虫传播。主要侵害绵羊；牛易感，但以隐 性感染为主；山羊也可感染，但一般不表现出症状。反刍类动物感染 蓝舌病的死亡率平均为
30% ,其中绵羊的发病死亡率高达80%o
上述疫病羊均可感染，发病有的以牛为主，有的以羊为主，有的 牛羊均可发生，危害巨大。由于都可引起水疱性病变，因此在临床中 很容易混淆，不能及时确诊，导致疫情不断加重，不断扩散，给我省 新兴的山羊养殖产业带来巨大的危害。由于没有系统的快速鉴别上述 疫病的试剂盒或方法，因此本研究拟开展这方面的研究，并建立快速 鉴别方法，并在实验室和临床开展应用和防控示范。对于及时发现、 诊断和采取相应防控措施具有重要意义。
二、建设目标和内容
(-)研究内容
(1 )主要研究的内容
上述五种疫病基因数据库检索、PCR、Realtime-PCR引物设 计、快速诊断检测技术建立与反应条件研究。对已有技术进行评估和 优化；对未有的技术，需重新建立快速灵敏的方法，以用于临床流行 病学调查和解决生产实际问题。
同时鉴别检测五种疫病的PCR、Realtime-PCR方法的建立。
主要从引物兼容性、产物长短分布、反应条件方面进行摸索、优化。
临床应用验证。通过对送检样品进行检测和对养殖场进行病病 排查，验证所建立的方法，对所存的问题加以修正。组装试剂盒进行 应用，开展流行病学调查。
示范应用。建立示范点，在养殖地区综合应用临床综合防控技 术，建立综合防控示范养殖场。
疫病防治技术培训。在规模化养殖场或大型会议上进行饲养 员、防疫员的技术培训。
（二）拟解决的关键问题
项目主要建立多重PCR和荧光定量PCR的快速鉴别方法。引起 水疱症状的病毒种类多，在不知道要检测的为何种病毒时，需要全面 考虑。建立快速鉴别诊断技术需要同时进行处理多种核酸性质的病 毒，增加了难度。但从整体上来说，可以分为2大类，即RNA和DNA （下图）o因此需要同时提取RNA和DNA,且要防止