实验三霉菌、放线菌的形态观察及微生物的分离纯化
主讲:裴国风程国军
一、实验目的
观察放线菌、霉菌的形态结构特征
学习掌握霉菌染色的基本方法
基本掌握细菌、放线菌、霉菌菌落形态特征
实验(一)霉菌、放线菌的形态观察
二、实验原理
放线菌:是一类介于细菌和真菌之间的微生物,个体形态复杂,G+,具多核的单细胞原核生物,是抗生素的主要产生菌。它由不同长短的纤细的菌丝形成单细胞菌丝体。菌丝体分为两部分,即潜入培养基中的营养菌丝(或称基内菌丝)和生长在培养基表面的气生菌丝。有些气生菌丝分化成孢子丝,呈螺旋形、波浪形或分枝状等。气生菌丝及孢子的形状和颜色常作为分类的重要依据。
霉菌:凡在营养基质上形成绒毛状、棉絮状或蜘蛛网形丝状菌体的真菌,统称为霉菌。霉菌包括分类学上许多不同纲或类的真菌,它们分别属于藻状菌纲、子囊菌纲、担子菌纲和半知菌类。霉菌菌丝分为有隔菌丝和无隔菌丝两类.
黑曲霉
属于半知菌亚门, 菌丝有隔,细胞多核;部分气生菌丝细胞形成特化的厚壁、膨大的足细胞,由足细胞的中间稍呈垂直地向上延长,形成分生孢子梗。
青霉
属于半知菌亚门,分生孢子梗基部无足细胞,孢子梗顶端不膨大成囊,而是多次分枝形成扫帚状,小梗末端形成分生孢子。
根霉
横向生长的菌丝产生假根,附着在基质上。
菌丝无隔、无性生殖产生孢囊孢子,有性生殖产生接合孢子。
三、实验材料
放线菌和真菌培养物
1. 放线菌培养物
2. 黑曲霉培养物。
3. 黑曲霉、根霉、青霉示范片。
显微镜、载玻片、接种环、解剖针、解剖刀、酒精灯、镊子等。
乳酸石炭酸棉兰染液、碘液、酒精、蒸馏水等。
主要观察黑曲霉菌丝分隔情况和分生孢子着生情况(辨认顶囊、分生孢子梗、足细胞和分生孢子)
用解剖针挑取少量曲霉菌块(适当带一点培养基)放在载玻片的一侧,在菌块上滴50%乙醇一滴,轻轻拨动、洗涤菌块,在同一玻片的另一侧加一滴水滴(或棉蓝染液),将洗去分生孢子的菌块置于棉蓝染液中,用解剖针将菌丝尽量分散,盖上盖玻片,用橡皮或塑料请轻轻敲击,10x ,40x观察。
四、实验步骤
插片法培养放线菌
取插片一片,直接在显微镜下进行观察,注意分界面两侧菌丝形态的差异
观察放线菌气生菌丝和基内菌丝、孢子丝的区别
载玻片直接观察法
方法同霉菌
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