生物化学实验--教学课件.ppt

《生物化学实验》
周小慧
实验室规则
1、自觉遵守学习纪律,保持实验室肃静,不得喧哗吵闹、迟到早退,更不得缺席。
2、爱护仪器,厉行节约。试剂、药品、蒸馏水等应节约使用,不得浪费。如不慎损坏仪器,应及时报告老师,说明原因,经老师同意后,方可换领。并应按规定赔偿或处理。贵重、精密仪器,应先熟悉使用方法,在老师的指导下,严格按操作规程操作,发现故障,应立即报告老师,不得擅自处理。
实验室规则
3、取用试剂时,应仔细辨明标签,以免取错。取完试剂后,应及时将瓶盖盖好,放回原处,切忌乱拿乱放,“张冠李戴”。
4、注意安全,用吸量管吸取试剂时应使用吸球,严禁用嘴吸取。对于有毒、腐蚀的试剂更应注意,应避免其直接接触人体及衣物。乙醚、丙酮等易燃试剂应远离火源,以免发生意外。
实验室规则
5、注意实验室卫生、整洁。废弃液体应倒入水槽,放水冲走,实验用过的和棉花、废纸、沉淀废渣及其他废弃物品等均应放入指定容器,不得随意乱扔或丢进水槽。实验结束后应将实验台整理好。并清扫、整理实验室。关好水、电、门、窗,经老师检查同意后,方可离开实验室。
实验须知
1、实验前应作好预习,认真阅读实验指导。明确学习目标,能简述实验内容及主要的操作步骤。
2、实验过程中,应根据实验指导及老师的要求,认真操作,细心观察,如实记录。严禁捏造实验数据,提倡实事求是的科学态度,实验做错应要求重做,反对弄虚作假。
3、实验结束后,要认真书写实验报告,及时交老师批阅。实验报告包括如下内容:①实验项目、②实验原理、③主要操作步骤、④实验结果、⑤分析与讨论等。
实验报告
实验报告包括如下内容:
1、实验项目
2、实验原理
3、主要操作步骤
4、实验结果
5、分析与讨论等
实验项目
实验1:改良双缩脲试剂测定种子蛋白质含量
实验2:维生素C的测定
实验3:鞣质含量的测定(络合滴定法)
实验4:植物组织中过氧化物酶活性的测定
实验5:淀粉的分离制备与净化
实验6:总淀粉量的测定
实验7:糖苷的提取、分离、精制与检识
实验8: Cytc的制备及测定
实验1: 改良双缩脲试剂测定种子蛋白质含量
一、实验原理:
具有两个或两个以上肽键的化合物皆有双缩脲反应,因此蛋白质在碱性溶液中,也能与Cu2+形成紫红色络合物,颜色深浅与蛋白质浓度成正比,故可用来测定蛋白质的浓度。
蛋白质或多肽
加热
稀碱溶液
CuSO4
紫红色
二、操作步骤
1、 1、制作标准曲线:取12支干试管,编号,按下表平行操作。
0
1
2
3
4
5
标准蛋白液/mL
蒸馏水/mL
双缩脲试剂/mL
0















0

摇匀,置40℃水浴中保温15min,然后以0号试管为空白对照,在550nm处比色
A550
蛋白质浓度mg/ mL
以A550(取两组测定的平均值)为纵坐标,蛋白质浓度为横坐标,绘制标准曲线。