es your footer 1实验:转氨基作用——纸层析法生化教研室 es your footer 2 验证肝脏内存在具有转氨基作用的酶。初步掌握纸层析的原理和方法【实验目的】【实验目的】 es your footer 33. 茚三***显色原理 【实验原理】【实验原理】 es your footer 4 转氨基作用转氨基作用在转氨酶的作用下, α-氨基酸的-NH2 和α-***酸的-C=O 相互转化,生成相应的α-***酸和α-氨基酸的过程。磷酸吡哆醛【实验原理】【实验原理】 es your footer 5 最常见转氨酶: 转氨基作用 GPT 谷丙转氨酶( glutamic pyruvic transaminase ) GOT 谷草转氨酶( glutamic oxaloacetic transaminade ) 所有转氨酶的辅酶都是维生素 B 6的磷酸酯--- 磷酸吡哆醛。【实验原理】【实验原理】 es your footer 6(谷丙转氨酶) (谷丙转氨酶) (***酸) (丙氨酸) R 1氨基酸 R 2***酸 R 1***酸 R 2氨基酸 PLP (α-***戊二酸) (谷氨酸) 【实验原理】【实验原理】 es your footer 7 层析技术是近代生物化学最常用的分离技术之一。它是利用混合物中各组分的理化性质(吸附力、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力、分配系数等)的差异,在两相运动中,不断地进行交换、分配、吸附及解吸附等过程,可将各组分间的微小差异经过相同的重复过程而达到分离。无论哪种层析均由固定相和流动相组成。 es your footer 8用水饱和的水滤纸有机溶剂+结合水= ————————————样品在固定相中的浓度( C 固) 样品在流动相中的浓度( C 流) 分配系数 K固定相流动相 OH OH OH OH :滤纸:有机溶剂【实验原理】【实验原理】 es your footer 9 B O 迁移率R f = —————————————— A 点样点到斑点中心的距离( AB ) 点样点到溶剂前沿的距离( AO ) 【实验原理】【实验原理】 es your footer 10 迁移率 Rf与分配系数 K的关系 K K Rf Rf 增加增加样品的移动速度样品的移动速度减少减少减少减少减少减少减少减少 C C 固固增加增加增加增加增加增加 Rf Rf与与K K 呈呈反反比比【实验原理】【实验原理】
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