产几丁质酶菌株的筛选与鉴定及几丁质酶酶学性质的研究.pdf

中南大学
硕士学位论文
产几丁质酶菌株的筛选与鉴定及几丁质酶酶学性质研究
姓名:熊晶
申请学位级别:硕士
专业:微生物学
指导教师:夏金兰
20090101
摘要性热门科研课题。的产生。通过对混合碳源中还原糖的测定,发现只有当培养基中葡萄糖几丁质为自然界丰富的天然资源,具有可再生性,生物相容性,生物可降解性,生物功能性等特点,是许多高新技术领域中不可替代的生物医用和环境友好材料,具有广泛的用途。几丁质酶是几丁质专一性降解所需的酶。开展几丁质酶的研究,对几丁质资源的转化,己成为全球本文从湖南养虾场,河流等地筛选到一株产几丁质酶的真菌一,并对其进行了分类鉴定;对该菌株产的几丁质酶进行了分离纯化,研究了温度和对几丁质酶降解胶体几丁质的酶活性的影响以及葡萄糖和胶体几丁质等底物对该菌株几丁质酶表达的影响。菅肪患嘌螅捎闷桨逋该魅Ψń谐跎福玫株可在以几丁质为唯一碳源的选择性固体平板上形成明显透明圈的菌株,对该昃懈瓷福竦靡恢瓴富盍ο喽越细叩恼婢鶦眯翁Ш头肿由镅侄味愿镁杲辛思ǎü云菌落特征、个体形态的观察和序列分析,最终确定该菌株为烟曲霉。捎醚挝觯汗瞬阄觯肝觯垡叶寂ㄋ酰胱咏换徊析,冷冻干燥等方法分离纯化几丁质酶。狿蚐—分析确定了该几丁质酶为牡ヌ迕浮耘ㄋ醮棵肝2牧希芯苛宋露群蚿约付≈拭副砉刍盍Φ挠响。结果表明:在幕撼逡褐校泵阜从ξ露却锏媸北砉刍性最大;在婕湎喽员砉刍钚远荚ヒ陨希得鞲贸趺敢壕哂宽的高温适应范围,这对直接利用该菌株进行发酵降解胶体几丁质具有重要意义。糖咕闏嘌诓煌荚吹呐嘌校⑾郑币%葡萄糖为碳源培养时,在整个培养过程中始终没有检测到几丁质酶活力;而以ソ禾寮付≈首魑L荚唇信嘌保嘌羖陀屑付≈拭活力产生,;在以胶体几丁质和葡萄糖为混合碳源的培养基中进行培养时,在培养早期没有检测到几丁质酶活力硕士学位论文
耗尽时,才能检测到几丁质酶活力的产生。上述结果表明,.产几丁质酶属于诱导型表达。关键词烟曲霉,几丁质酶,几丁质,纯化硕士学位论文摘要Ⅱ
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日期:牛年』月上日作者签名:鲣学位论文版权使用授权书原创性声明本人声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校并通过网络向社会公众提供信息服务。工作及取得的研究成果。尽我所知,除了论文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内容,可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,
刊≥馏砨绪论第一章几丁质及其应用类取之不尽,用之不竭的巨大再生资源宝库】.【。的几丁质,溶解度、分子量、乙酰基值和比旋光度等均有差别。几丁质的化学结构与纤维素极其相似。纤维素是葡萄糖以,擒战岷闲纬傻亩嗵恰5毕宋仄咸由于存在乙酰氨基和羟基,分子间的氢键作用比纤维素更强。因此,几丁质进行化学反应比纤维素更难。难溶于一般溶剂,如水、有机溶剂、稀酸和稀碱,但可几丁质又名甲壳素、甲壳质、壳多糖,是由阴#.、擒占=,化学名称为,.【。W匀唤缰校付≈使惴捍嬖谟诩卓歉俣虾、蟹的甲壳,昆虫的甲壳,真菌湍浮⒚咕和植物缒⒐的细胞壁中。几丁质储量丰富,在自然界中其含量仅次于纤维素,≈实睦砘灾通常情况下几丁质为白色、无毒、无味、耐晒、耐热、耐腐蚀、不怕虫蛀的结晶或无定形物,相对分子质量可达几十万至几百万,采用不同原料和不同方法制备糖环位置的羟基被乙酰胺基取代是几丁质迹】.【图付≈屎拖宋亟峁贡冉溶于浓硫酸、浓盐酸、%磷酸、无水甲酸及一些特殊溶剂中,如二甲基乙酰胺一甲壳素,纤维鬃硕士学位论文第一章绪论甧,。
几丁质无毒无味,酶降解后可被人体组织吸收,在医学领域有着广泛的应用【能物质不被人体吸收而排出体外,从而减少食品所提供的热量,达到减肥的目的【捌;氯化锂、患谆量┩橥R宦然然旌先芗痢<付≈史肿优帕性诟叨冉峋⑾维的晶格中,这种微纤维位于无定形多糖或蛋白质机体中。根据苌涔馄椎玫降结果,几丁质按晶体结构分为汀型和丫型三种,伉·甲壳质具有紧密的组成,大多数结晶的多晶区是逆平行链状排列;甲壳质的晶型则是平行链状排列;一甲壳质是两条链之间上下排列。志椭衋型最为稳定,并在自然界中广泛存在俊!