分解纤维素的微生物的分离.docx

课题3分解纤维素的微生物的分离
【导学诱思】
.纤维素是 类物质，是自然界中纤维素含量最高的天然产物，
此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。
.纤维素酶是一种复合酶， 一般认为它至少包括三种组分， 即、和 ,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖， 第三种酶将纤维二糖分解成 。
正是在这三种酶的协同作用下， 纤维素最终被水解成葡萄糖，为微生物的生长提供营养，同
样，也可以为人类所利用。
.在做纤维素酶分解纤维素的实验过程中，如果没有摇床，可以采用何种方法代替？
.筛选纤维素分解菌可以用 法，这种方法能够通过 直接对 微生物进行筛选。
.在土壤中取样的方法有：① ;②
.刚果红是一种 ,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但 并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。
思考：
①怎样利用刚果红的这一特点来筛选纤维素分解菌？
②利用刚果红染色的方法有几种？各自的优缺点是什么？
.分离分解纤维素的微生物的实验流程图如下： 一 一梯度稀
释f f o
思考：⑴此流程图与样品的稀释和稀释液的取样培养流程图有何异同？
⑵为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？
⑶将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？
【疑难点拨】
.分离分解纤维素的微生物的实验流程与稀释液的取样培养流程图有何异同？
它们的区别是：稀释液的取样流程图是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮 源的选择性培养基上，直接分离得到菌落。分离分解纤维素的微生物的实验流程通过选择培 养，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本相同。
.将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？
将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集， 实际上是人工设置纤维素分解菌的生存
的适宜环境。一般应将纸埋于深约 10cm左右腐殖土壤中。
.两种刚果红染色法的比较
刚果红在筛选纤维素分解菌上的应用已经有超过 20年的历史，在本课题中我们给出了
两种方法。方法一是传统的方法， 缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂； 其优点是这样显示出的颜色反应基本上纤维素分解菌的作用。 方法二的优点是操作简便， 不
存在菌落混杂的问题， 缺点是由于纤维素和琼脂、 土豆汁中都含有淀粉类物质， 可以使能够
产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应。但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模 糊，因为培养基中纤维素占主要地位， 因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分。 方法二的
另一缺点是：有些微生物具有降解色素的能力， 它们在长时间培养过程中会降解刚果红形成
明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分。
.为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？
在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖， 而那 些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。
【典例解析】
例1 .有关谷氨酸发酵的叙述中正确的是
B .培养条件不当将不能得到产品
D .冷却水可使酶活性下降
解析：进行谷氨酸发酵的菌种是异养需氧型微生物， 所以要在培养过程中不断通入空气，
但是必须通入的是无菌空气，普通空气是不行的，容易造成