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环境因子对亚麻酸抑制两株赤潮微藻生长的影响


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　　[摘 要]在实验室条件下，比较研究了温度、光照和藻初始密度等环境因子对亚麻酸抑制赤潮微藻米氏凯伦藻和赤潮异弯藻生长的影响。结果表明，亚麻酸对处于生长初期和指数生长期不同密度的米氏凯伦藻细胞均有抑制作用，处于生长初期的米氏凯伦藻的抑制效果更加明显。温度、光照对亚麻酸抑制赤潮微藻的生长具有显著影响，抑制效果30°C>25°C>10°C>20°C，光暗比0h：24h>12h：12h>24h：0。可通过调节上述因素的协同作用，以增强亚麻酸克制有害微藻米氏凯伦藻及赤潮异弯藻的效果。
　　[关键词]赤潮微藻；化感作用；环境因子；抑制
　　中图分类号：P635 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2019）04-0385-02
　　赤潮是一种对水环境造成危害的生态异常现象。有害赤潮的防治成为科学界海洋生态领域关注的热点[1]。一些研究将特定水生植物的化感作用作为对有害藻类进行生物防治的一种方法[2-4]。本课题组在之前研究中发现大型海藻鼠尾藻、缘管浒苔和小珊瑚藻均对有害藻赤潮异弯藻和东海原甲藻具有显著抑制效果，并分离得到亚麻酸等化感物质[5]。
　　一个特定水域生态系统的组成及动态变化受到很多外界条件包括物理、化学及生物因素的影响，例如光照、温度、营养盐、资源竞争、捕食以及共生相克作用等[6-8]。水生生态系统中的环境因子，例如温度、盐度、光照和pH等都在进行持续复杂的动态变化，这对水域生物的生理生化活动有着不可忽略的影响作用[9]，進而影响了它们之间的化感作用[10]。当环境中各因子变化时，既能增强水生生物间的化感作用，也能减弱这种作用[11]，目前还少有报道。在赤潮的发生和演替过程中，赤潮藻的种群密度在赤潮发生阶段的初期、爆发期以及稳定期的规模势必不同，在最恰当时期投放相应抑藻物质则可以更高效快速地达到杀藻效果，因此，抑藻物质投加的时机也至关重要。
　　米氏凯伦藻（Kareniamikimotoi）和赤潮异弯藻（Heterosigmaakashiwo）是两种赤潮优势藻种，在世界范围内的许多地区引发过赤潮，引起海洋生态环境的严重破坏及经济损失[12-13]。为探究大型海藻分泌物亚麻酸对赤潮微藻化感作用适应的最佳环境条件，本研究设置不同温度、光照、微藻初始生长密度等环境因子，以期通过化感作用与环境因子的影响，为通过调节环境因子来增强大型海藻分泌物对有害赤潮微藻的化感作用提供科学依据。
　　1材料与方法
　　
　　米氏凯伦藻（Kareniamikimotoi）和赤潮异弯藻（Heterosigmaakashiwo）无菌藻种由中国海洋大学微藻研究实验室提供。实验用亚麻酸（α-Linolenic acid， ALA）为分析纯，购于美国Sigma公司，用***将其配制成1 mg·L-1的工作液，密封避光保存于4 ℃冰箱。培养微藻选用f/2培养基[14]。培养条件：放于智能光照恒温培养箱中，设定温度（20±2）℃，光照强度3 000 lux，光暗比12 h：12 h。
　　
　　
　　将米氏凯伦藻和赤潮异弯藻母液用无菌f/2培养液稀释至8×104 cells·mL-1，将两种藻液与亚麻酸加入三角瓶中，使终体积为40 mL。为排除***的影响，增加***对照组。共培养7～8 d，取微藻于光学显微镜下用血球计数板计数种群密度。实验设三组平行。
　　
　　分别以10 ℃、20 ℃、25 ℃和30 ℃的f/2培养液进行抑藻实验。将米氏凯伦藻藻液与亚麻酸放入上述四种不同温度培养箱中。藻类生长状况以细胞密度为指标，采用血球计数法计数。实验共进行96h。。
　　 不同光照的抑藻实验
　　取等量亚麻酸工作液与赤潮异弯藻培养液混合。光照实验设定为全光照（光暗比24 h ：0 h，全光照）、光循环（光暗比12 h：12 h，半光照）和全黑暗（光暗比0 h：24h，全黑暗）3种光照处理条件，实验共进行96 h。。
　　 不同藻密度的抑藻实验
　　在三角瓶中分别加入处于生长初期和指数生长期的米氏凯伦藻藻液和亚麻酸，用f/2培养液添加至40 mL，验证亚麻酸对不同初始藻密度藻细胞生长状况的影响。未加亚麻酸的藻液为对照。
　　
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