课题3　分解纤维素的微生物的分离 (2).ppt

课题2 分解纤维素的微生物的分离
1、知道纤维素酶的种类及作用
2、初步掌握从土壤中分离出分解纤维 素的微生物的实验方法
教学目标:
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一、纤维素和纤维素酶
纤维素
Ｃ１酶
Ｃｘ酶
纤维二糖
葡萄糖苷酶
葡萄糖
（多糖）
与刚果红作用
红色复合物
不与刚果红作用
纤维素酶是一种复合酶
刚果红染色法
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刚果红染色法
方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应
方法二：在倒平板时就加入刚果红
思考：这两种方法各有哪些优点与不足
方法一 缺点是操作烦琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发 生混杂；优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用
方法二 优点是操作简便，不存在菌落混杂问题
缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质，可以使能产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应；缺点二有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红，形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分
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二、实验设计
：选择纤维素丰富的环境（将滤纸埋入约10cm土壤中）
:配制 的选择培养基
刚果红染色法
土壤取样
选择培养
样品稀释
鉴别培养
挑选产生 的菌落
以纤维素为唯一碳源
透明圈
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选择培养
1、选择培养的目的：
增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物
2、制备选择培养基
参照课本29页旁栏中的比例配置，回答下列问题
a、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？
b、这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具 有，是如何进行选择的？
c、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用
是液体培养基，原因是配方中无凝固剂
有选择作用，本配方中的碳源是纤维素，所以能分解纤维素的 微生物可以大量繁殖
用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照
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3、操作方法：
将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下震荡培养1～2天，直至培养液变浑浊。也可重复选择培养
思考：为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？
在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用
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