分子诊断学：单基因遗传病的分子诊断.ppt

单基因遗传病的分子诊断
遗传性疾病分子诊断的策略
一、直接诊断策略
二、基因多态性连锁分析
三、基因突变的定量（dosage）诊断
四、产前诊断
定义：直接检测导致遗传性疾病的各种基因突变
类型：
点突变
缺失
插入
倍增
前提：基因已经克隆，序列和结构清楚
一、直接诊断策略
一、直接诊断策略
针对不同类型的突变，可以使用不同的方法进行检测，不同的方法可互补。
目前，几乎所有类型的突变都有相应的方法检测到。
一、直接诊断策略
突变类型
方法
举例
微小突变
错义/无义突变
剪接突变
调控区序列突变
小缺失/插入
基因测序，AS-PCR，PCR-RDB
Wilson病
…
拷贝数变异
简单拷贝
复杂拷贝
片段分析
PCR; TP-PCR; TP-msPCR; msPCR
脆性Ｘ综合征
…
大片段插入/缺失
MLPA(连接酶依赖性探针扩增)
DMD;
SMA;
CMT1A
复杂的重排
长片段PCR
HA血友病Ａ
一、直接诊断策略
二、基因多态性连锁分析
检测原理：多态性连锁分析、关联分析
检测前提：
致病基因尚未被定位和阐明
基因太大
突变种类太多
检测方法：RFLP，STR，SNP
三、基因突变的定量诊断
检测内容：大范围的重复、缺失
检测方法：
细胞分裂中期染色体检测
固相杂交
PCR 扩增
产前诊断
是在遗传咨询的基础上，通过遗传学检测和影像学检查，对高风险的胎儿进行鉴别诊断，对患胎采用选择性流产，从而降低出生的缺陷率，有利于提高优生质量和人口素质。
脐血（24-28周）、羊水（16-20周）或者绒毛组织（9-11周）
无创性产前诊断
母血污染的问题
单基因病遗传病的分子诊断
一、血红蛋白病（hemoglobinopathy）
二、血友病（hemophilia )
三、肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy)
四、苯***尿症(phenylketonuria)
五、囊性纤维化(Cystic fibrosis)
六、亨廷顿病(Huntington Disease)
七、脆性X综合征(Fragile X syndrome)