HPLC培训教程PPT教案.pptx

HPLC培训教程
一、什么是液相色谱?
历史概述和定义
液相色谱的定义是二十世纪早期由俄罗斯植物学家 Mikhail S. 茨维特提出的。他最先尝试在装满颗粒的柱子上使用溶剂来分离从植物中提取的化合物[树叶色素]。
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一、什么是液相色谱?
混合物最有效的分离、分析方法。
色谱法是一种分离技术。
混合物分离过程：试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配。
一相固定不动，称为固定相。
另一相是携带试样混合物流过固定相的流体(气体或液体)，称为流动相。
如果是气体称之为气相色谱，那液体就是液相色谱。
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一、什么是液相色谱?
液相色谱的形式
薄层色谱法
纸层析法
柱色谱法
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一、什么是液相色谱?
什么是高效液相色谱法[HPLC]?缩写 HPLC,
高压 (high-pressure) 早期的泵只能承受 500 psi [35bar]。这就被称为高压液相色谱法[HPLC]
随着这一期间不断的性能改进[更小颗粒，更高压力], 字母缩写保持一样，但全称变为高效 (high-performance) 液相色谱[HPLC]。高效液相色谱[HPLC]是目前分析化学最强大的工具之一。它能够分离、定性和定量任何可以溶解在液体中的化合物。
缩写LC是指Liquid Chromatography
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一、什么是液相色谱?
HPLC的特点（一）
项 目
高效液相色谱法
经典液相色谱法
色谱柱：柱长/cm
柱内径/mm
10～25
2～10
10～200
10～50
固定相粒径/μm
5～50
75～600
色谱柱柱效
（理论塔板数）
2×103～5×104
2～50
柱压降/MPa
5～15
～
进样量/g
10-6～10-2
～10
分析时间/h
～
1～20
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一、什么是液相色谱?
HPLC的特点（二）
项 目
高效液相色谱法
气相色谱法
进样方式
样品制成溶液
样品需气化或裂解
流动相
溶液
惰性气体
分离原理
吸附、分配、筛析、亲和等
吸附和分配
检测器
UV、PDA、RID等
TCD、FID、ECD等
应用范围
低、中、高沸点有机化合物
离子型无机化合物
热不稳定化合物
生物活性分子
低沸点有机化合物
永久性气体
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二、HPLC的应用
在食品研究中的分析应用
食品中的天然成分
碳水化合物
类脂化合物、甘油三酸酯、胆固醇
脂肪酸和有机酸
蛋白、肽、氨基酸
食品添加剂
酸味剂、甜味剂、香精、乳化剂
抗氧化剂、防腐剂
颜料和染料（色素〕
维生素
污染物
霉菌（黄曲霉***〕
农药和兽药残留
多环芳烃（PAHS〕和亚***
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二、HPLC的应用
在医药研究中分析应用
常用药物研究中的应用：解热镇痛药、镇静药、安定药、心血管药、磺***类消炎药等。
甾体药物研究中的应用：肾上腺皮质激素、雄性激素、雌性激素和孕激素等。
抗菌素类药物研究中的应用：青霉素、头孢菌素、庆大***、四环素、***霉素、诺***沙星等。
中草药研究中的应用：生物碱、甙类(皂甙、强心甙、黄***甙等)、萜类
手性药物研究中的应用：光学异构体的拆分(如解毒剂D-青霉***毒性小，L-异构体毒性很强)
医疗药物的检测、新药研究、药物代谢、药代动力学研究。
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二、HPLC的应用
在生物化学和生物工程中的应用
氨基酸、多肽和蛋白质的分析研究
核碱、核苷、核苷酸和核酸的分析研究
生物***的分析研究（儿茶酚***类)
在精细化工分析中的应用
醇、醛和***、醚的分离分析
酸和酯的分离分析
表面活性剂的分析
聚合物的分析研究
药物、农药、染料、炸药等工业产品
在无机离子分析中应用
饮用水、酸雨、土壤中阴离子和阳离子分析
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