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Document serial number【KKGB-LBS98YT-BS8CB-BSUT-BST108】
无名字微波辅助提取
微波辅助提取-高效液相色谱法测定蔬果中Vc含量
摘要 本实验先采用微波辅助萃取法快速萃取柠檬中的Vc，以1mol/L乙酸为萃取剂，再采用高效液相色谱进行定性定量分析，以3%的乙***L KH2PO4水溶液作为流动相。通过对比停留时间进行定性分析，通过计算峰面积以及制作校准曲线进行定量分析。校准曲线在Vc浓度在5-100mg/L范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系，相关系数为。结果测得柠檬中Vc的含量为100g。本实验方法具有用样少、分析快、操作简单、准确度高等特点。
关键词 微波提取 高效液相色谱 维生素C 柠檬
1 引言
维生素C（Vitamin C, Vc）又叫抗坏血酸，是一种水溶性维生素。Vc在体内参与多种反应，如氧化还原过程，在生物氧化和还原作用以及细胞呼吸中起重要作用。人体内缺乏Vc时容易导致坏血病。同时，由于Vc是一种水溶性的强有力抗氧化剂并参与胶原蛋白的合成，它同时还具有防癌、预防动脉硬化、治疗贫血、抗氧化和提高人体免疫力等功效。Vc在蔬果中普遍存在，尤其是柑桔类水果中含量较高。樱桃、番石榴、辣椒、猕猴桃等水果中Vc含量在50-300 mg/100 g。
微波辅助提取利用与极性物质的热效应及非热效应来提高提取效率，且以水或醇为溶剂，对环境无污染。[1]
测定 Vc常用的方法有靛酚滴定法，分光光度法及高效液相色谱法等。靛酚滴定法测定的是还原型抗坏血酸，反应终点为粉红色，但如果果蔬的汁液为红色则会产生干扰，滴定终点不易判断。[2]而分光光度法操作费时[3]，高效液相色谱法是目前发展较快的一种检测方法，其具有高效、快速、稳定、可靠等特点。
微波辅助萃取具有快速高效、操作简便、节省溶剂等优点，在天然产物、环境、食品等领域中得到广泛应用。本实验采用微波辅助萃取法快速萃取蔬果中的Vc，采用高效液相色谱进行分析，以Vc标准系列溶液的色谱峰面积对其浓度做校准曲线，根据样品中Vc的峰面积，由校准曲线计算其浓度。本实验方法具有用样少、分析快、操作简单、准确度高等特点。
2 实验部分
仪器试剂
仪器
高效液相色谱仪：LC-20AT；微波萃取仪（上海新仪微波化学科技有限公司）；色谱柱：依利特或PhenomenexC18柱(250mm×，。
试剂
乙***（色谱纯），冰乙酸，维生素C，磷酸二氢钾等均为分析纯；小西红柿、桔子或西红柿样品。实验用水为超纯水。
Vc标准溶液：快速准确称取 Vc，用1mol/L乙酸溶液溶解，定量转移至250mL容量瓶中，用1mol/L乙酸溶液定容，得到100mg/L标准溶液备用，现用现配。
色谱条件
流动相：3%的乙***LKH2PO4水溶液（v/v）；流速1mL/min；柱温为室温，紫外检测波长265nm；进样量10μL。
实验步骤
按操作说明开启液相色谱仪，设定方法参数。
校准曲线绘制：分别配制 5，20，50，80，100 mg/L 的 Vc 样品溶液，待液相色谱稳定后进样分析。以Vc 色谱峰面积对浓度作图，绘制校准曲线。
样品准备：准确称取柠檬果肉，以1 mol/L乙酸50 mL 为萃取溶剂，微波功率