《胚胎的不同处理对兔类es细胞分离培养的影响-论文》.pdf

擞熊毙糖缝蹴獬黻
⋯ 麓：：／／． 蹁
胚胎 的不 同处理对兔类 细胞分离培养 的影 响
徐秋 勤 张 君涛 李小 佳 王鸽 曹书 郡 张胜 军 魏莉 莉 高 培滨 王新 庄 张 志平“
河 南农业大学牧医工程 学院，郑卅
同等贡献作者
通讯作者，．
摘 要 探 讨 兔 胚胎 的不 同处理 方 法对 兔 早 期胚 胎 体 外发 育 能力 的影 响 ，筛选 出适 合
兔类胚胎干细胞，分离培养的兔胚胎的较佳处理方法。将兔胚胎用种不同的方式进
行处理，观察兔类细胞贴壁、克隆、生长情况 ，并对所得的兔类细胞进行碱性磷酸酶活性鉴定、干细
胞 转 录 因子 的检测 和 体 外分 化 能力 的鉴 定 。结果 显示 ，挑 破透 明带法 和 胚胎 分割 法 较对 照组 得
到 的胚 胎 更容 易贴 壁和 增 殖 ，差 异 显著 ．，虽然 离散 胚 组 的胚 胎 贴壁 率 ．％显 著 高 于挑破 透 明
带组 ．％．，但 挑破 透 明 带组 的 形 成 率．％高 于离 散胚 组 ．％．，挑 破 透 明带
组 。、：代 兔 类 细 胞 的 克 隆率 分 别 为 ．％和 ．％，均 显 著 高于 其 他 两 组．，最 高传 至 代 。
获 得 的 兔 类 细胞 经 碱 性 磷酸 酶 染 色 检测 呈 阳 性 。提 取 兔类 细 胞 集 落 的 ，经 检 测 ，得
到 扩 增 多能基 因 、和 与预期 大 小 一致 的 目的片 段 。体外 分 化形成 具 有 个 胚层 构成 的
类 胚体 ，。结 果表 明，挑 破 透 明带有 利 于提 高从 兔胚 胎 中分离 胚胎干 细 胞 的效率 ，能
更 好 的支 持兔 类 细 胞 的培养 与 增殖 。
关键词 类胚胎干细胞，分离，培养，胚胎处理，兔
．
—
— ——
— Ⅵ — —”
， ，

．


一
．—，，
—’