从槐花米中提取芦丁.doc

现代化学实验技术实验 1 从槐花米中提取芦丁一、目的要求(1 )学****从天然产物中提取黄***苷的原理和方法。(2 )学****重结晶提纯固体物质的原理和方法。(3 )掌握黄***苷的纸色谱检验操作。二、实验原理芦丁又称芸香苷, 广泛存在于植物中, 其中槐花米中的含量达 12% ~ 16% 。芦丁有调节毛细血管壁渗透性的作用,临床用作毛细血管止血药,也作为高血压症的辅助治疗药物。芦丁是糖苷类化合物,常含三分子结晶水,呈淡黄色针状结晶,熔点为 174 ~ 178 C ,无水物的熔点为 188 C 。芦丁在冷水中的溶解度为 1:10000 , 沸水中为 1:200 ; 冷乙醇中为 1:650 , 沸乙醇中为 1:60 ; 易溶于碱性水溶液,难溶于酸性水溶液,几乎不溶于苯、***、***仿等。本实验是利用芦丁易溶于碱性水溶液、酸化后又析出的性质进行提取,并利用它在冷水中和热水中溶解度相差较大的特性进行重结晶提纯。芦丁是糖苷类化合物,其糖苷键在酸性条件下可水解产生对应的甙元——槲皮素, 所以芦丁的分离鉴定可用纸色谱进行, 常用乙酸乙酯: 甲酸:水( 6:1:3 ) 或正丁醇: 冰醋酸: 水( 4:1:5 )作展开剂。三、主要仪器和试剂 1. 主要试剂槐花米、石灰乳、浓盐酸、 pH 试纸、质量分数 95% 乙醇、展开剂(乙酸乙酯: 甲酸:水=6:1:3 )、显色剂(质量分数 2% 三***化铝) 、饱和芦丁标准品乙醇溶液、饱和槲皮素标准品乙醇溶液。 2. 主要仪器 250mL 烧杯、 500mL 烧杯、抽滤瓶、布氏漏斗、滤纸、表面皿、毛细管、铅笔、直尺、色谱滤纸(中速、 20cm × 7cm ) 、色谱缸、烘箱、电炉、台平。四、操作步骤 1. 芦丁的提取取 10g 槐花米, 置于 250mL 烧杯中, 加入 100mL 水, 煮沸, 在搅拌下缓缓加入石灰乳至 pH=8 ~ 9 ,在此 pH 下保持微沸 20~ 30min ,趁热抽滤,残渣再加 50mL 水,同上法再煎一次,趁热抽滤。合并滤液,在 60~ 70C 下用浓 HCl 调至 pH=4 ~5 ,使沉淀完全,抽滤,沉淀用少量蒸馏水洗涤,抽干, 60C 干燥得粗芦丁。 2. 芦丁的精制用水重结晶:将粗芦丁置 500mL 烧杯中,加入适量蒸馏水,加热煮沸,趁热抽滤。滤液静置, 充分冷却,析出芦丁晶体,抽滤,产品用蒸馏水洗涤, 70~ 80C 烘干,称重,得芦丁产品。 3. 芦丁的纸色谱检验样品:饱和芦丁自制品乙醇溶液。对照品:饱和芦丁标准品乙醇溶液和饱和槲皮素标准品乙醇溶液。支持剂:色谱滤纸(中速, 20cm × 7cm )。展开剂:乙酸乙酯: 甲酸: 水( 6:1:3 )。显色剂:质量分数 2% 三***化铝喷雾。五、实验结果 1 、粗芦丁为土黄色粉末,精制后的芦丁产品为淡黄色粉末。 2 、产率: 3、芦丁纸色谱显色中: 在色谱中, 对照品饱和槲皮素标准品乙醇溶液有明显显色现象, 饱和芦丁标准品乙醇溶液显色不明显;样品饱和芦丁自制品乙醇溶液有显色,但其显色最高点和槲皮素显色点高度不一致,最低点显色不明显。六、分析与讨论 1 、芦丁颜色正常,因为粗芦丁中海混有杂质,所以颜色较精制后芦丁深。 2、精制芦丁产率较低, 可能是因为: 乘热抽滤时溶液温度下降, 芦丁析出留在滤纸上; 还有部分芦丁未从槐花米中煮出;芦丁转移过程中损失等等。 3 、实