hsulf1基因腺病毒表达载体构建及其抗肿瘤机制实验研究.pdf

苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不含为获得苏出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人承担本州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作声明的法律责任。论文作者签名:
日期:纰吐形压里世在——年一月解密后适用本规定。如以占苏州大学学位论文使用授权声明么釜坐如本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定,即:学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所蚍绞莸缱映霭嫔、中国学术期刊馀贪电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文,可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口非涉密论文叼论文作者签名:本学位论文属期:导师签名:
中文摘要中又捅斐第一部分蛳俨《颈泶镌靥宓墓菇人体正常组织中恒定表达,而在绝大多数的肿瘤细胞系和肿瘤组织中缛橄侔变多种信号通路的活性。本研究旨在通过构建的腺病毒载体将目的基因的方法构建携带增强型绿色荧光蛋自基因的对照腺病毒瓻人硫酸酯酶琱且桓鱿赴さ母合虻骺匾蜃樱胰腺癌、肾脏癌、肝细胞癌等泶锼较碌鳌R延醒芯恐っ鳎琢鱿赴衕基因的再表达会导致细胞增殖、迁移、侵袭能力有所减弱,同时促进药物诱导的肿瘤细胞的凋亡,抑制肿瘤发生和血管形成。虮嗦搿址蓟蛩狨ッ福在细胞外间质中降低硫酸肝素糖胺聚糖的硫酸化程度,进而影响与硫酸乙酰肝素蛋白聚糖密切相关的多种胞外信号分子与其相应受体结合的过程,从而改送到血管内皮细胞和肿瘤细胞中,在体内外研究鞍锥杂谙赴鲋秤肭ㄒ能力的影响,为临床上肿瘤的基因治疗提供了新的分子靶标。【目的】克隆人硫酸酯酶基因并构建稳定表达的腺病毒载体【方法】采用椒ù,构建@米H臼约粒甴鉴定同时进行庑颍ㄕ泛螅罅坷┰霾⒋炕M法测定病毒滴度。【结果鉴定和测序结果都证实,螋坎《。法测病毒滴度,甴./哉詹《。将与腺病毒包装质粒一起转入细胞中,得到重组腺病毒【结论】成功构建了蛳俨《颈泶镌靥錋一,为进一步体内╬蛳俨《颈泶镌靥宓墓菇ḿ捌淇怪琢龌频氖笛檠芯文摘要甴痬
第二部分虻墓泶锒匝9苣谄は赴鲋城ㄒ颇芰第三部分蛲ü碌鱒藕磐贩⒒涌怪琢效应的体外实验研究的影晌的表达水平恢复到证巾水爿‘;细胞内磷酸化的表达变化;笛榧觳鈎过表达对于细胞增殖的影响;采用划痕实验研究泶锒杂贓细胞迁移的影响。【结论】重组腺病毒甴榈嫉膆基因在赴械墓【方法】通过对不同肿瘤组织标本免疫组化检测虻谋泶锴榭觯【目的】研究虻墓泶锒杂谌似昃猜瞿谄は赴鸈增殖、迁移能力的影騩【方法】应用蛋白质免疫印迹法检测蛟贓细胞中的表达及【结果】免疫印迹结果表明蚬泶锘嵯碌鱁细胞藕欧肿拥牧姿峄剑幌赴鲋呈笛榻峁砻鱤基因过表达抑制了赴鲋常腥靖词时细胞存活率下降%以及%;划痕实验结果表明蚬泶锬芄灰种葡赴那ㄒ疲笛组相比于对照组,,为糜谥琢黾把9苌は喙丶膊〉幕蛑疗奠定了基础。【目的】通过体外实验研究蛉绾瓮ü跋霽藕磐贩⒒抗肿瘤效应。检测肝癌、卵巢癌细胞中导入蛞约案扇舎基因后的表达变化;笛榉直鸺觳鈎基阁的表达,的沉默以及两者联合对于肝癌、卵巢癌细胞增贿的影响。虻难粜员泶锫史直鹞%、。ァ%、.ァ%,相比于跣缘母伟琱阳性的肝癌组织样本甐、;结果、疆示肝癌、卵巢癌细咆·】【结果】在肝癌,乳腺癌,胃癌,肾癌,和结肠癌样卅拿庖咦榛峁允蛳俨《颈泶镌靥宓墓菇ḿ捌淇怪琢龌频氖笛檠芯中文摘要
裸鼠肿瘤模型的建立及研究虻谋泶锒粤第四部分内血管密度和肿瘤生长的影响笛榻峁砻鱤基因的表达,的沉默都会导致肝癌、卵巢瘸细胞存活率下降,两者联合后肿瘤细胞存活率进一步降低。【结论】在大多数人类肿瘤中,蚴Щ钍恰ǜ銎毡榈南窒螅辉诟伟【目的】建立小鼠肿瘤模型,通过体内实验研究虻谋泶锒杂谛∈【方法】建立小鼠肝癌、卵巢癌移植瘤模型,给予蛑瘟疲鄄煲【结论】以裸鼠为实验动物分别建立卵巢癌赴闪瞿P秃透伟和卵巢癌细胞中,虻谋泶锘嵯碌鱬训的表达水平,肿瘤细胞增殖能力减弱。肿瘤生长以及瘤内血管生长的影响。植瘤的生长情况,免疫组化及验证砸浦擦鲅9苊芏燃靶【结果】成功建立小鼠肝癌、卵巢癌移植瘤模型,两个模型中都表现为甴橹琢錾ひ种谱钗C飨裕肟瞻锥哉兆橄啾龋殉舶┠P妥橐种坡为.%,肝癌模型组抑制率为.%.┮