牛肉膏蛋白胨培养基配方.docx

牛肉膏蛋白陈培养基配方：
牛肉膏蛋白陈培养基是一种应用最广泛和最普通细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。 它含有牛肉膏、蛋白陈和NaCI。其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源，磷酸盐、蛋白陈主 要提供氮源，而NaCI提供无机盐。在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。琼 脂在常用浓度下96c时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化，以 免琼脂烧焦。琼脂在40C时凝固，通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂含量根据 琼脂质量和气温不同而有所不同。
由于这种培养基多用于梯掰晒(荤食),因此，要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微 碱性,以利于细菌生长繁殖。
牛肉膏蛋白陈培养基配方如下：
牛肉膏 3g、蛋白陈 10g、NaCI 5g、琼脂 15—20*** 1000mk pH 7. 4—7. 6 ( —)
三、器材
牛肉膏，蛋白陈,NaCI,琼脂；1mol/L NaOH, 1mol/L HCI：
试管，三角烧瓶，烧杯，量筒，玻棒，培养基分装器，扭力天平，牛角匙，高压蒸汽灭菌锅， pH试纸(pH 5. 5—9. 0),棉花，牛皮纸，记号笔，麻绳，纱布等。
四、操作步骤
.称量
按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白陈、NaCI放入烧杯中。牛肉膏常用玻棒挑 取，放在小烧杯或表而皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。也可放在称量纸上，称量后直接 放入水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会及称量纸分离，然后立即取出纸片。蛋白陈很易吸 潮，在称取时动作要迅速。另外，称药品时严防药品混杂，一把牛角匙用于一种药品，或称 取一种药品后，洗净、擦干，再称取另一药品，瓶盖也不要盖错。
.溶化
在上述烧杯中可先加入少于所需要水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。待 药品完全溶解后，补充水分到所需总体积。如果配制固体培养基，将称好琼脂放入已溶化药 品中，再加热溶化，在琼脂溶化过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂。最后补足 所失水分。
.调 pH
在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向培养基 中逐滴加入1mol/LNaOH,边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH值，直至pH达7. 6。 反之，则用1mol/LHCI进行调节。注意pH值不要调过头，以避免回调，否则，将会影响 培养基内各离子浓度。
对于有些要求pH值较精确微生物，其pH调节可用酸度计进行(使用方法，可参考有关说 明书)。
.过滤
趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利结果观察。一般无特殊要求情况下，这一步可以省去(本 实验无需过滤)。
.分装
按实验要求，可将配制培养基分装入试管内或三角烧瓶内。分装装置见图V-1。
分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。
(1)液体分装分装高度以试管高度1/4左右为宜。
(2)固体分装分装试管，其装量不超过管高1/5,火菌后制成斜而，如图V-20分装三角烧瓶 量以不超过三角烧瓶容积一半为宜。
(3)半固体分装试管一般以试管高度1/3为宜，灭菌后垂直待凝。
.加塞
培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物进入培养基内而 造成污染，并保证有良好通气性能(棉塞制作方法附本实验后而)。
.包扎
加塞后，将全部试管用麻绳捆