K-B纸片法.ppt

K-B纸片扩散法抗生素敏感性实验
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PPT制作：光光

钰儿
现场演讲：子翔
小组成员
查阅资料：阿妹
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实验原理
实验方法及结果
实验优缺点
目录
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实验原理
第一部分
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实验原理
纸片扩散法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片的周围形成一种浓度梯度。在药物扩散的同时，纸片周围抑菌浓度范围内的测试菌不能生长，而抑菌浓度范围外的菌株则继续生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈。不同抗菌药物抑菌圈的直径因受药物在琼脂中的扩散速率的影响而可能不同，抑菌圈的大小可反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关，即抑菌圈越大，MIC越小
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实验方法
第二部分
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药敏纸片制备
细菌制备
实验方法
培养基制备
接种
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培养基制备
培养基的种类：
进行细菌药敏试验所用的培养基种类较多。M—H 培养基琼脂浓度越大、抑菌圈直径越小。有研究证明3种不同M—H 培养基进行纸片扩散法，实验结果相同。
浓度1．0 ～ 2．0 、pH 7．4左右
培养基的质量：
4 mm 厚平板，允许±1mm误差，如此控制平板厚度即可满足试验要求。有研究证明，平板每增厚或减薄1mm，抑菌圈相应减小或增大0．7mm。
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药敏纸片制备
实验常规抗菌药物选择：
在标准中分成A、B、C 、U四组, A组所列的抗生素为常规首选药敏试验药物,B组为临床使用主要抗生素,尤其在医院感染时使用的抗生素，可在下列情况下使用：①对A组同类抗生素耐药；②标本来源不同时，如三代头孢菌素使用于脑脊液中的肠杆菌，磺***甲恶唑使用于尿道分离的细菌；③多种微生物感染；④多
部位感染；⑤感染流行的控制；⑤对A组抗生素
过敏、耐受或无反应。
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药敏纸片制备
C组药物用于对A组药物耐药的流行菌株或
对A组药物过敏的病人和某些不常见的细菌
（如肠外分离的沙门菌属或耐万古霉素肠
球菌）。
U组仅用于尿道中分离的细菌，不作为尿道
外分离菌的常规药敏试验。
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