遗传实验2-2 粗糙链孢霉生活史及.ppt

实验二 粗糙链孢霉生活史及杂交
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［一、实验原理］

粗糙链孢霉属于真菌中的子囊菌纲。粗糙链孢霉的菌丝体是单倍体（n=7），每一菌丝细胞中含有几十个细胞核。由菌丝顶端断裂形成分生孢子。
分生孢子有两种，小型分生孢子中含有一个核，大型分生孢子中含有几个核。分生孢子萌发成菌丝，可再生成分生孢子，周而复始，这是粗糙链孢霉的无性生殖过程。
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链孢霉（Neurospora crassa）的生活史
图8-19
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粗糙链孢霉的菌株有两种不同的接合型，用A,a 或mt+, mt-表示，他们受一对等位基因控制。不同结合型菌株的细胞接合产生有性孢子，这过程称为有性生殖。有性生殖可以通过两种方式进行。
一是产生原子囊果，内附有产囊体，若另一接合型的分生孢子落在这原子囊果的受精丝上时，分生孢子的细胞核进入受精丝，到达产囊体，形成接合型基因的异核体。
二是不同接合型的菌株的菌丝连接，两种接合型的细胞核发生融合形成合子，产生子囊果。
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其中，1 和2 是未交换的，称第一次分裂分离子囊；3-6 都是发生交换的，称第二次分裂分离子囊。
因此，统计第二次分裂分离子囊占总子囊数的比例，，就可决定某一基因与着丝粒之间的重组值。重组值去掉%（即乘以100），即为该基因图距。
粗糙链孢霉的子囊和子囊型
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粗糙链孢霉的子囊和子囊型
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本实验用赖氨酸缺陷型（记作Lys-）与野生型（记作Lys+）杂交，得到的子囊孢子分离为4个黑的（＋），4个是灰的（-）。黑的孢子是野生型；赖氨酸缺陷型孢子成熟迟，所以呈灰色。根据黑色孢子和灰色孢子在子囊中的排列顺序，可有6种子囊类型。 子囊型（1）和（2）的产生如图。第一次减数分裂（M1）时，带有Lys+的两条染色单体移向一极，而带有Lys-的两条染色单体移向另一极。Lys+/Lys-这对基因在第一次减数分裂时分离，称第一次分裂分离。第二次减数分裂（M2）时，每一染色单体相互分开，形成四分体，顺序是＋＋——或——＋＋，再经过一次有丝分裂，成为（1）和（2）子囊型。形成这两种子囊型时，在着丝粒和基因对Lys+/Lys-间未发生过交换，是第一次分裂分离子囊。
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图中（3）和（4）的形成。由于Lys基因与着丝粒间发生了一个交换，Lys+/Lys-在第一次减数分离时没有分离，到第二次减数分裂（M2）时，带有Lys+的染色单体才和带有Lys-的染色单体相互分开，所以称为第二次分裂分离。然后再经一次有丝分裂，形成4个孢子对，顺序是＋＋--＋＋--或--＋＋--＋＋。这是第二次分裂分离子囊。
（5）和（6）子囊型的形成与（3）和（4）类似，也是两个染色单体发生了交换，不过交换不是发生在第2条染色单体与第3条染色单体之间，而是发生在1，3或2，4两条染色单体之间。
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粗糙链孢霉lys+与lys-杂交子囊孢子的排列顺序
(1)、(2)为非交换型
(3)、（4)、(5)、(6)为交换型子囊
(7)、（8)、(9)、(10)是由转换造成的异常比例
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［二、实验目的］
1． 掌握粗糙链孢霉的杂交技术；
2． 统计杂交结果，计算基因图距。
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