糖化血红蛋白.ppt

糖化血红蛋白HbAlc的分析原理和意义
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糖化血红蛋白是什么?
糖化血红蛋白（ HbAlc ）是红细胞中血红蛋白与葡萄糖缓慢、持续且不可逆地进行非酶促蛋白糖化反应的产物。形成两周后不易分开。当血液中葡萄糖浓度较高时，人体所形成的糖化血红蛋白含量也会相对较高.
正常生理条件下，非酶促糖化反应产物的生成量与反应物的浓度成正比。由于蛋白质浓度保持相对稳定，糖化水平主要决定于葡萄糖浓度，也与蛋白质与葡萄糖接触的时间长短有关。
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糖化血红蛋白和血糖有何差别?
空腹血糖和餐后血糖是反映某一具体时间的血糖水平，容易受到进食和糖代谢等相关因素的影响。而由于人体内红细胞的寿命一般为120天，在红细胞死亡前，血液中HbAlc含量也会保持相对不变。因此HbAlc水平反映的是在检测前120天内的平均血糖水平，可以稳定可靠地反映出检测前120天内的平均血糖水平，且受抽血时间，是否空腹，是否使用胰岛素等因素干扰不大。所以说空腹和餐后2小时血糖只是诊断糖尿病的标准，而衡量糖尿病控制水平的标准是糖化血红蛋白。
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临床常用的测定糖化血红蛋白HbAlc的方法
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乳胶凝集反应法

乳胶凝集反应法是利用抗原抗体直接测定总血红蛋白Hb中的糖化血红蛋白HbAlc的百分含量。目前有国内外几家厂商可以提供HbAlc测定的试剂盒。这种免疫反应是由被测血样品中的总Hb和HbAlc与试剂中的抗体结合而形成凝集，凝集量随HbAlc浓度的大小而变化。使用生化分析仪器来进行比浊测定HbAlc的浓度，采用终点法，生化仪通过测定反应液的吸光度值，可直接反映出凝集量的多少；推算出HbAlc占Hb的百分含量。
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测定时，仪器多采用660nm单色光做主波长，通过标准曲线得出实测值。由于这种试验其标准曲线是非线性的，所以在测定前，首先用随试剂盒一起带有的5种不同浓度的定标液，做出5点非线性标准曲线。曲线和数值存在生化仪的贮存器中，测定样品时，实测出的吸光度值A与标准曲线比较，由仪器求出实测样品中的HbAlc的百分含量。乳胶凝集反应法测定HbAlc简便、不用增加仪器，可直接用自动生化分析对样品进行快速测定。
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离子交换高压液相色谱法
色谱分析是一类利用混合物的各组分在不同相上的分配差别，在两相物质相对运动过程中，将混合物中的各种成份分离开的一种分析技术。液相色谱是以液体或固体为固定相，以液体为液动相的色谱法的总称。色谱法又叫色层或层析，这一技术在生命科学研究中用于生物活性物质的分析；生物活性物质是以混合物形式存在，人类血液中的蛋白质有上千种，只有把混在一起的被测蛋白分离出来，才能准确测定；在HbAlc的测定时，可以通过高精度HPLC，将HbAlc从Hb中分离出来，从而得到准确的数值。
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使用离子交换高压液相色谱HPLC来测定HbAlC的百分含量目前被认为是分析HbAlC的金标准。采用HPLC方法工作的全自动糖化血红蛋白分析仪器，以其快速、简便、精巧、准确等特点，受到越来越多用户的欢迎。
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进样器
高压泵
分离柱
检测器
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HbAlC的临床意义
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