新型诊断技术和应用PPT教案.pptx

会计学
1
新型诊断技术和应用
主要技术
Realtime-PCR
差异显示PCR
RFLP
PCR-SSCP
FISH
基因芯片
一、定量PCR
对DNA或RNA样本的靶序列进行定量分析。
主要用于基因表达的分析、病原体核酸的检测等
在定量PCR反应体系中，除了常规PCR反应所需的材料和试剂外，还必须引入内参照系统。
内参照系统一般选用与待测序列结构无关的基因常用的内参照基因是-肌球蛋白基因
荧光定量PCR（fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR），又称实时PCR，是目前较精确的进行定量检测PCR的方法
FQ-PCR通过荧光信号对PCR过程中产物量进行实时监测，精确计算出PCR的初始模板量
荧光信号的检测方法：
1、DNA结合染料技术
2、水解探针技术（TaqMan probe）技术
3、杂交探针技术
TaqManTM
5’
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Thermal Stable
DNA Polymerase
Primers
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Add Master Mix
and Sample
Denaturation
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Annealing
Reaction Tube
Taq
l
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R
Q
Probe
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R
Q
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TaqManTM
Extension Step
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1. Strand Displacement
Taq
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Q
R
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Q
Taq
R
5’
2. Cleavage
3. Polymerization
Complete
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Q
Taq
R
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4. Detection
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Q
Taq
R
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l
R
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R
Q
实时定量RT-PCR检测CEA基因拷贝数在监测胃肠癌微转移中的应用