实验四酶的特性实验.doc

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说明：本实验由四个小实验组成，其中第一个实验（酶的专一性）必做，其他三个小实验选做（至少做一个）
写实验报告时，可以只写需要做的实验内容！
实验四 酶的特性实验
一、实验目的
酶是生物催化剂，生物体内化学反应基本上都是在酶的催化下进行的。通过本实验了解酶催化的特异性、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响，对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。
二、实验内容
本实验由酶的专一性实验、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响4个小实验组成。
（一）酶的专一性
1、实验原理
本实验以唾液淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用为例，来说明酶的专一性。淀粉和蔗糖无还原性，唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性二糖的麦芽糖，但不能催化蔗糖的水解。用班氏试剂检查糖的还原性。班氏试剂为碱性硫酸铜，能氧化具还原性的糖，生成砖红色沉淀氧化亚铜。
2、材料、仪器与试剂
(1)材料：新鲜配制的唾液及其稀释液
(2)仪器：恒温水浴；沸水浴；试管及试管架；
(3)试剂：2%蔗糖溶液；% %淀粉溶液；班氏试剂。
3、实验操作
（1）稀释唾液的制备
①唾液的获取
用一次性杯取一定量的饮用水，漱口以清洁口腔，然后在嘴中含10-20ml饮用水，轻漱2min左右时间，即可获得唾液的原液，内含唾液淀粉酶。
②不同稀释度唾液的制备（用大试管）
本实验需制备1：1、1：5、1：20、1：50、1：200等五个不同浓度的稀释唾液。
举例说明：1:5指的是稀释了5倍的唾液，制备方法为1份原液+4份蒸馏水。
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1：20指的是稀释了20倍的唾液，制备方法为1份1：5的稀释液+3分蒸馏水。
（2）唾液淀粉酶最佳稀释度的确定（严格按表1添加顺序做实验，用小试管做实验）
表1 唾液淀粉酶稀释度的确定
管号
1（1：1）
2（1：5）
3（1：20）
4（1：50）
5（1：200）
%淀粉溶液（滴）
4
4
4
4
4
稀释唾液（ml）
1
1
1
1
1
37℃恒温水浴中保温5分钟
班氏试剂（ml）
1
1
1
1
1
沸水浴2～3分钟
实验结果
（2）淀粉酶的专一性
表2 淀粉酶专一性实验
管号
1
2
3
4
5
6
%淀粉溶液（滴）
4