淫羊藿苷对体外培养破骨细胞影响实验研究.pdf

兰州大学
硕士学位论文
淫羊藿苷对体外培养破骨细胞影响的实验研究
姓名:吕明波
申请学位级别:硕士
专业:外科学(骨外科)
指导教师:刘兴炎
20070501
中文摘要淫羊藿苷对体外培养破骨细胞影响的实验研究破骨细胞是导致骨质吸收的主要细胞,体外培养破骨细胞是研究骨吸收与抑制骨吸收药物作用机理的基本方法,本研究分别采用破骨细胞培养法和骨髓诱导培养法体外培养破骨细胞,通过观察活体细胞、染色、染色及骨吸收陷窝甲苯胺兰染色鉴定破骨细胞,并用不同浓度的中药淫羊藿苷进行干预,探讨了淫羊藿苷对成熟破骨细胞骨吸收功能和其凋亡的影响以及对破骨细胞诱导生成的作用,同时本研究应用技术,研究了淫羊藿苷对破骨细胞《。为此本研究完成了以下个实验:实验阂蜣杰斩蕴逋馀嘌贸墒炱乒窍赴俏展δ芎偷蛲龅挠跋臁2用破骨细胞培养法,体外分离培养乳兔成熟破骨细胞,与玻片及骨磨刺激破骨细胞。倒置相差显微镜下观察活体细胞、染色、染色及骨吸收陷窝甲苯胺兰染色鉴定破骨细胞,并进行骨吸收陷窝计数和面积测量,吖啶橙与空白对照组比较/骨细胞凋亡率均明显增高,骨吸收陷窝数目、面积明显减少,随浓度增加抑制作实验阂蚵窜斩孕∈蠊撬柙葱云乒窍赴盏忌杉肮俏展δ艿挠跋臁采用骨髓诱导培养法,用终浓度分别为/、/、/腗—逋庥盏寂嘌∈蠊撬柙葱云乒窍赴诖斯讨屑尤下观察活体细胞、染色、染色及降钙素受体染色鉴定破骨细胞,计数片共同培养,用/疞、//ǘ鹊囊蜣杰染色观察凋亡破骨细胞所占的比例,结果表明:/疞浓度的淫羊藿苷组破用增强,差异有显著性。终浓度分别为/疞、/囊蚶佘铡5怪孟嗖钕晕⒕骨片上骨吸收陷窝数及面积,玻片上阳性多核细胞数,结果显示:兰州人学硕上学位论文
的阳性多核细胞数呈量的依赖性的减少,与非加药组比较,/./∈笃乒窍赴《鞍住表达的影响。用浓度分别为/、/、疞的狢、逋庥盏寂嘌∈蠊撬柙葱云乒窍赴别加入疞的淫羊藿苷,培养螅樘嶙躌,采用半定量法检测破骨细胞中《鞍住Ⅶ。结果显示:与空白对照组比较,疞的淫羊藿苷可明显下调《鞍住的表达无明显影综合以上实验结果本研究得出如下结论:⒁蜣杰站哂幸种铺逋馀嘌乒窍赴俏展δ艿淖饔谩⒁蜣杰站哂写俳逋馀嘌乒窍赴蛲龅淖饔谩⒁蛉剀站哂幸种铺逋釸、瓹和诱导的骨髓源性⒁蜣杰湛上碌魈逋馀嘌乒窍赴《鞍譵谋泶铮饪赡苡胍制破骨细胞生成及骨吸收有关。⒁蜣杰湛上碌魈逋馀嘌乒窍赴鸕的表达,说明淫羊藿苷可能通过作用于介导的核因子藕抛5纪罚种破乒窍赴化成熟及骨吸收功能。关键词:破骨细胞细胞培养淫羊藿苷骨吸收凋亡加药组随淫羊藿苷浓度的增加,骨片上形成的骨吸收陷窝数及面积,玻片上、...
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吕明淑原创性声明行研究所取得的成果。学位论文中凡引用他人已经发表或未发表的成本人郑重声明:本人所呈交的学位论文,是在导师指导下独立进果、数据、观点等,均已明确注明出处。除文中已经注明引用的内容外,不包含任何其他人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本人的研究成果做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式表明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名:
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前言骨质疏松是全身骨量减少,骨组织显微结构破坏,骨密度降低,引起骨折危险性增加的一种疾病,老年人尤其是绝经后妇女极易受累,是危害中老年人健康的常见病之一,随着人口老龄化,患病率逐年上升。据欧盟年的报道,骨质疏松性骨折终生危险,女性高达%,男性占%:到年,髋骨骨折人数将由年的蛉嗽鲋万人;的女性存在骨质疏松症性骨折的危险,男性每酥杏幸蝗耸芾邸>萃臣疲侵适杷芍⒂跋斓蛎拦人,每年因骨质疏松及相关问题的医药费及经济损失达~诿涝!S⒐约有万骨质疏松症患者;欧洲每年岁以上的居民有因骨质疏松而发生骨折,医疗费用在年内将增加丁N夜本⑸虾:统啥市的骨质疏松流行病