缬沙坦对扩张型心肌病大鼠心肌线粒体结构及功能的影响.pdf

江苏大学硕士学位论文摘要目的:。方法:40只SD大鼠完全随机分为3组,正常对照组(C组,n=lO), 扩张型心肌病模型组(M组,n=15),缬沙坦干预组(V组,n=15)。M 组及V组给予多柔比星(2mg·kg一,每周1次)腹腔内注射法建模,V 组在建模同时给予缬沙坦(30mg·k分1·)灌胃,共8周。①心功能检测:超声心动图检测左室舒张末径(LVEDD)、左室收缩末内径(LVESD)、左室射血分数(LVEF)及左室短轴缩短率(LVFS);②超微结构检测:电镜下观察各组大鼠心肌线粒体超微结构;③比色法检测各组大鼠心肌细胞内氧化应激指标[丙二醛(MDA)/总 SOD/】的改变;④2’,7’一二氯荧光乙酰乙酸盐()荧光探针检测各组大鼠心肌细胞内活性氧(ROS)的生成;⑤ Rhodaminel23染色检测各组大鼠心肌线粒体膜电位;⑥比色法检测 Na+K+.ATP酶及Ca2+M92+_ATP酶的水平;⑦比色法测定各组大鼠心肌线粒体在高钙诱导下肿胀度;⑧免疫组化检测心肌细胞内第二个线粒体来源的胱氨酸酶激活剂(Smac)蛋白的表达;***@Western blot法测定心肌细胞内凋亡诱导因子(AIF)及Smac蛋白表达水平。结果: ①各组大鼠超声心动图检测结果:与C组相比,M组LVEDD显著增大[(-)vs(±)mm,P<】,V组LVEDD为(± 江苏大学硕士学位论文 )ram,较C组增大(尸>),);与C组相比, M-Z>t'f[LVESD显:著增大[(±)vs(± 9)mm,P<],V组 LVESD为(-)mm,较C组显著增大(),而较M组显著减小();与C组相比,M组LVEF显著下降[(±)vs(" )%,P<】,V组LVEF为(±)%,较C组显著下降(尸<), 而较M组显著上升();与C组相比,M组LVFS显著下降[(+ )vs(-)%,P<】,V组LVFS为(±)%,较C组显著下降(P<),)。②各组大鼠心肌线粒体超微结构观察:与C组比较,M组线粒体体积明显增大、嵴断裂、空泡化,而V组线粒体超微结构完整性要较M组明显改善。⑧各组大鼠心肌细胞氧化应激指标的检测结果:与C组比较,M组 MDA水平显著增高[( 4-)vs(-)nmol/mgprot,P<], V组MDA为( 4-)nmol/mgprot,较CN增高∽),而较M组显著降低(尸<);与CN比较,M组总SOD(T-SOD)水平显著降低[(±)vs(±)U/mgprot,P<],( 4-)U/mgprot,较C组降低(,I>)而较M组显著增高(P<);与C 组比较,【(±)vs( 4- )U/mgprot,P<],V组CuZn—SOD茭J(±)U/mgprot, 较C组下降(尸>),而较MN_显z著改善();与C组比较,M组 【(-)vs(±)U/mgprot,P<], (-)U/mgprot,较C组显著下降(),而较江苏大学硕士学位论文 M组略增高()。④各组大鼠心肌细胞内ROS检测结果:与C组比较,M组大鼠心肌细胞ROS荧光强度显著增强,而V组ROS荧光强度较C组增强而较M组减弱。⑤各组大鼠心肌线粒体膜电位结果:与C组比较,M组心肌线粒体 Rhl23荧光强度显著下降[(+)vs(),P<】; V组心肌线粒体Rhl23荧光强度为(±),较C组显著下降(P<),而较M组显著增高(尸<)。⑥各组大鼠心肌细胞内ATP酶检测结果:与C组比较,M组 Na+K+.ATP酶显著降低[(1 ±)vs(±)U/mgprot, P<],V组Na+K+.ATP酶为(-t-)