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巨噬细胞消解贫铀颗粒的作用研究.doc


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巨噬细胞消解贫铀颗粒的作用研究.doc
文档介绍:
巨噬细胞消解贫铀颗粒的作用研究
杨陟华,潘秀颉,孙平,曹芳,朱茂祥
军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850
目的:研究贫铀(DU)颗粒对巨噬细胞的毒性作用及巨噬细胞吞噬DU颗粒方式与消化溶解作用,为DU损伤的医学防护及DU促排提供依据。
方法:以巨噬细胞(AM)为研究对象,采用难溶性贫铀颗粒对巨噬细胞进行染毒,采用投射电镜观察巨噬细胞吞噬铀颗粒的方式;采用酶联免疫分析法测定吞噬过程中酸性磷酸酶(ACP)、溶菌酶(LZP)变化;采用湿消化法测定巨噬细胞吞噬铀颗粒后上清中可溶性铀含量变化;通过液体悬浮芯片测定分别测定上清中IL-1b、IL-10、IL-6、GM-CSF、IL-5、IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、 IL-8等细胞因子含量;通过CCK-8法测定巨噬细胞存活;化学/荧光发光仪检测不同浓度贫铀对巨噬细胞的细胞内活性氧变化;采用Griess Reagent法、DTNB法检测活细胞内活性氮(NO)及谷胱甘肽变化。
结果:投射电镜下,DU颗粒最终在溶酶体中被吞噬消化,并随颗粒浓度的增加,DU颗粒在巨噬细胞内成空泡状;细胞内ACP含量随时间及浓度的增加,酶的含量下降,而LZP含量并没有随时间与浓度的增加出现上升或下降;巨噬细胞上清中可溶性铀明显增加;IL-1α、TNF-α、IL-4及IL-8表达上升;巨噬细胞存活率显著下降;巨噬胞内活性氧、活性氮上升,谷胱甘肽下降。
结论:DU经巨噬吞噬后在溶酶体中被溶解消化成可溶性铀,并通过氧化应激这一机制损伤巨噬细胞。
关键词:贫铀,巨噬细胞,吞噬,可溶性铀
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