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一 实验目的
1、学****离体小肠平滑肌灌流的实验方法;
2、证明小肠平滑肌具有自动节律性和紧张性活动,观察若干刺激对离体小肠运动的影响。
二 实验原理
动物的胃肠道由平滑肌组成,胃肠道平滑肌除具有肌肉的共性,如兴奋性、传导性和收缩性之外,尚有自己的特性,主要表现为紧张性和自动节律性收缩,可以形成多种形式的运动,主要有紧张性收缩,蠕动。此外,胃还有明显的容受性舒张,小肠还有分节运动及摆动。如果将动物的小肠平滑肌离体,放置在各种化学成分、渗透压、pH、温度以及气体供应等因子十分接近机体的内环境的溶液中时,可保持离体小肠段长时间地存活下来,并可以观察到小肠平滑肌的自动节律性、紧张收缩性、伸展性和对机械牵拉、温度刺激、化学刺激十分敏感,而对电刺激和切割刺激不敏感等一系列特性。通常用台式液做灌流液,将小肠的一端固定,另一端连张力换能器,即可通过一定的记录装置记录下小肠肌的收缩曲线。
三 使用仪器、材料
仪器:细线,注射器,恒温平滑肌槽,计算机生物信号采集处理系统,张力换能器,万能支架,螺旋夹,双凹夹,温度计,橡胶管,制氧机等。
材料:台氏液,1:5000肾上腺素,1:10000乙酰胆碱,1%CaCl2溶液,1mol/LHCl溶液,1mol/LNaOH溶液,阿托品等。
四. 实验步骤
开启恒温平滑肌槽电源,使其恒温工作点定在37摄氏度。
猝死兔子,剪取2-3cm长的十二指肠,用台氏液漂洗,置于低温台氏液中备用。
连接各种仪器,将小肠的两端分别与标本固定钩和张力换能器连接,让制氧机正常为台氏液供氧,进入计算机生物信号采集处理系统。
先后观察、记录37摄氏度台氏液中的肠段节律性收缩曲线,待中央标本槽内的台氏液温度稳定在37摄氏度后,停氧1min ,记录肠段节律性收缩曲线,恢复供氧,待台氏液中的小肠稳定后,分别换成22℃,45℃的台氏液,记录肠段节律性收缩曲线。再灌流37℃台氏液待肠段活动恢复后,依次滴加1mol/LNaOH溶液,1mol/LHCl溶液,1%CaCl2溶液1:5000肾上腺素,1:10000乙酰胆碱,阿托品观察肠段收缩曲线的改变。每次实验在观察到明显变化后,都应用预先准备好的37℃台氏液冲洗3次。
五 实验结果及分析
(1)缺氧对离体小肠活动的影响
从图一可以看出,正常情况下,离体家兔肠段收缩频率为17次/min,,最大值为35g。对浴槽内的离体小肠停氧的瞬间可以看到基线明显上移接着又下降回原来状态,其节律为16次/min, 收缩张力最小值为 ,。
张力:g
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单位:s
图一 缺氧对离体小肠活动的影响()
分析:在缺氧情况下,家兔离体肠段收缩频率和强度都略有下降,但在缺氧瞬间上移的基线是小肠对生理需要的适应,故收缩有所加强但时间很短。从实验得到的数据可以说明,氧气也是影响小肠活动的因素,缺氧时对小肠收缩活动有抑制作用。
(2)低温对离体小肠活动的影响
离体小肠在适宜的温度下,其节律为17次/min,小肠收缩张力最小为16g,。用25
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