石蜡包埋小鼠脑组织.doc

石蜡包埋小鼠脑组织
石蜡包埋小鼠脑组织
石蜡包埋小鼠脑组织
石蜡包埋
第一天:固定，取材当天即把所需包埋的组织（取出后放入4％的多聚甲醛中过夜(１2ｈ);
第二天：冲水，1２小时（注意水流不需要太大,不可将水流直接冲击组织)
脱水,６0％酒精4h白天(或者６０％酒精4℃过夜１2h）→
第三天:→70％酒精4ｈ→80％酒精4h→90％酒精4ｈ→９5％酒精4℃过夜(不一定1２小时） →
第四天:→10０%酒精Ⅰ2h→100％酒精Ⅱ2ｈ→100%酒精Ⅲ2ｈ→
透明,二甲苯Ⅰ5+3 mｉｎ→二甲苯Ⅱ5+3 miｎ→二甲苯Ⅲ　5+３ ｍin→二甲苯Ⅳ ３+2　miｎ→
(此处注意，在透明过程进行到此处时，应在浸完后拿出脑组织观察一下透明是否彻底，一般来说透明完全的脑组织是呈现为一个通体琥珀状，如果是发现脑组织内部仍呈现不通透的白色则继续酌情追加浸泡(透明)时间)
浸蜡,软蜡Ⅰ2h→软蜡Ⅱ２ｈ→软蜡Ⅲ　２ｈ→
中蜡包埋
备注:1、软蜡是指熔点４8-５0℃的石蜡,中蜡是指熔点５８—6０℃的石蜡。在包埋前应该提前将各种蜡准备好,放在对应的蜡缸里融好，注意不要加热太长时间。待蜡完全融好后关上煤气,冷却至烧杯上沿不是太烫手且蜡也未凝固是将蜡挪到60℃温箱里备用。在融蜡时要注意通风橱使用规范。
2、包埋组织块时要注意动作熟练紧凑,时间过长就会导致蜡温不够,，待切的面朝向包埋铁框面。包埋时勿将气泡带入．可以稍微倾斜一些放置塑料包埋框。
3、酒精串缸结束后，可以将组织拿出一部分出来观察一下是否切面平整，是否厚薄一致,以免影响透明的整齐度,导致组织透明的时间不一致。
石蜡包埋小鼠脑组织
石蜡包埋小鼠脑组织
石蜡包埋小鼠脑组织
4、酒精串缸结束后，把包埋盒用滤纸尽量弄干,然后再往二甲苯中放。
5蜡块包埋完成后不要急于挪动,待蜡块凝固后再将蜡块放到－２０℃冰箱里冷藏10min,以利于将铁框和包埋盒分离。