人群维生素E筛查方法.doc

C55
WS
中华人民共和国卫生行业标准
WS/T×××××—××××
人群维生素E缺乏筛查方法
Method for vitamin E deficiency screening
（送审稿）
××××-××-××发布
××××-××-××实施
中华人民共和国国家卫生健康委员会发布
××/T ×××××—××××
I
前  言
本标准按照 GB/T -2020给出的规则起草。
本标准起草单位：中国疾病预防控制中心营养与健康所、浙江省疾病预防控制中心、北京市疾病预防控制中心、深圳市计量质量检测研究院、深圳市慢性病防治中心、安徽省职业病防治院。
本标准主要起草人：陈竞、王睿、黄百芬、赵榕、王俊、杨国武、张京顺、李兵、杨丽琛、陈葆春。
本标准为首次发布。
人群维生素E缺乏筛查方法
范围
本标准规定了人群维生素E缺乏筛查的指标、参考判定值和检测方法。
本标准适用于人群维生素E营养状况的判定。
规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
WS/T 225 临床化学检验血液标本的收集与处理
术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
维生素E vitamin E
维生素E亦称生育酚，包括生育酚和三烯生育酚两类共8种化合物，即α、β、γ、δ生育酚和α、β、γ、δ三烯生育酚，其中α-生育酚是自然界中分布最广泛、含量最丰富、活性最高的维生素E形式，α-生育酚可作为人群维生素E的筛查指标。β-生育酚的活性为α-生育酚的50%，γ-生育酚的活性只有α-生育酚的10%。
维生素E缺乏 vitamin E deficiency
当人体血清（或血浆）α-生育酚含量值低于参考判定值时，可判定为维生素E缺乏。
人群维生素E营养状况判定指标及参考判定值
人群维生素E营养状况判定指标及参考判定值见表1。
表1 人群维生素E营养状况判定指标及参考判定值
判定指标
缺乏
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2
血清（或血浆）α-生育酚含量
μg/mL
μmol/L
＜
＜
单位换算1 μg/mL= μmoL/L
测定方法
第一法高效液相色谱法
按附录A规定的方法进行。
第二法 液相色谱串联质谱法
按附录B规定的方法进行。
维生素E标准溶液浓度校正和核查方法
按附录C规定的方法进行。
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3
（规范性附录）第一法液相色谱串联质谱法
（规范性附录）
第一法 高效液相色谱法
原理
试样中加入含有α-生育酚乙酸酯内标物的甲醇-乙***溶液（50/50，V/V）沉淀蛋白后，用正己烷提取，分取正己烷挥干后，用流动相定容，通过五***苯基柱（PFP）分离，将α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、α-生育酚乙酸酯内标物与其他杂质分离，经紫外检测器检测，内标法定量。
试剂和材料
本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
试剂
乙***（C2H3N）：色谱纯。
甲醇（CH4O）：色谱纯。
无水乙醇（C2H6O）：色谱纯。
2,6-二叔丁基对甲酚（C15H24O）：简称BHT。
正己烷（C6H14）：色谱纯。
试剂配制
甲醇-乙***溶液（50/50，V/V）：量取500 mL乙***，加入500 mL甲醇中，混匀。
甲醇-水溶液（90/10，V/V）：量取100 mL水，加入900 mL甲醇中，混匀。
标准品
α-生育酚（C29H50O2，CAS号：10191-41-0）, 纯度≥95%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
β-生育酚（C28H48O2，CAS号：16698-35-4）, 纯度≥95%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
γ-生育酚（C28H48O2，CAS号：54-28-4）, 纯度≥95%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
α-生育酚乙酸酯（C31H52O3，CAS号：7695-91-2）：纯度≥95%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
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4
标准溶液配制
α-生育酚标准储备溶液（ mg/mL）： mg α-生育酚标准物质，用无水乙醇溶解于50 mL容量瓶中，定容至刻度， mg/mL，按附录C进行储备液浓度校正。