鹿仙草活性成分提取纯化及抗氧化护肝活性研究.doc

鹿仙草活性成分提取纯化及抗氧化护肝活性研究筒鞘蛇菰( Balanophora involucrata . )为蛇菰科蛇菰属植物,别名鹿仙草[1],蛇菰为寄生性草本植物,一年或多年生,无叶绿素和气孔,叶退化呈鳞片状或不存在,无正常根, 靠根茎上的吸盘寄生于寄主植物的根上,根茎粗,通常分枝,表面常有瘤或星芒状皮孔,顶端具开裂的裂鞘。其全草入药,寄主分布于海拔 500-2600m 的多种林木,植株大多在中秋前后露出地面,生长季节性强,生长期短,故资源稀少。《本草纲目》将蛇菰以葛菜花之名列入菜部第 28卷,别名葛乳。蛇菰资源分布:分布于福建、湖北、广东、广西、四川、云南等地。具有壮阳补肾, 理气健脾,止血生肌,清热解毒的功效。民间常用于治疗阳痿, 慢性肝炎,消化道出血,月经过多,遗精,肿瘤等症。蛇菰的品种来源较多,采用不同的提取方法和检测手段, 得到的化学成分不尽相同。蛇菰属植物中所含化学成分有很大一部分是三萜类。另外甾醇类、多酚类[2]含量也较多,酚类有许多药理作用。 1919 年 Simon [3]等人从蛇菰中分离出蛇菰素;到 1998 年,刘锡葵[4]等人正式提出蛇菰素分为蛇菰素 A(balanophorin A) 和蛇菰素 B(balanophorin B)。含量较多的活性成分还有:苯丙素类化学成分,多数以酚类及其衍生物为主,如反式松柏苷。环烯醚萜和黄***类:环烯醚萜苷、二氢查耳***。鞣质:鞣质也是蛇菰属植物中的一类主要成分。到目前为止,人们共分离出 34种鞣质类化合物。其他成分:从蛇孤属植物中分离出来的化合物还有硬脂酸,多糖等。鹿仙草有效成分的提取方法有水提法、有机溶剂提取和超声提取。水提法是中草药传统提取方法。适用于有效成分能溶于水、对湿和热较稳定的药材。戴忠[5]从鹿仙草的水溶性成分中分离出 7种极性较强的化合物,分别为鞣花酸,香豆酸,咖啡酸,没食子酸,槲皮素,棉花苷,胡萝卜苷。鹿仙草中含有脂溶性成分, 沈小玲[6]用工业酒精浸提鹿仙草中的有效成分,浸提 3次,每次 24h ,合并浸提液,浓缩得粗品,然后用甲醇溶解,再经反复硅胶柱层析得到 4种化合物:松柏甙、***松柏甙、β-谷甾醇、乙酸羽扇豆醇酯。鹿仙草的超声提取是由于超声波振动的空化、机械粉碎、搅拌以及热力学作用,空化泡周围的微流也对提取原料产生切向力以加速溶剂向细胞中的渗透;超声还可使植物药材细胞被击破,有利于溶剂浸入细胞中,加速原料中的有效成分进入溶剂,因此提高了有效成分的提出率。戴忠[7]提取蛇菰中的化学成分时,取 2克样品,加入 30% 的甲醇 40ml ,超声 30min ,可使提取基本完成。使用不同的溶剂所提取的成分也不尽相同,可根据实验需要,采取适当的溶剂。鹿仙草的纯化方法主要有柱层析法。柱层析是以液体为流动相,利用溶质分子在流动相和固定相间的吸附和解析能力不同而实现分离的。高秀丽[8]以 95% 乙醇热回流提取 3次,浓缩得到浸膏, 上硅胶柱,用***仿-甲醇系统梯度洗脱得到反式咖啡酸、反式香豆酸、氢醌。王彦改[9]用 95% 乙醇回流提取得粗液,然后用乙酸乙酯进行萃取,用 Sephadex LH- 20( 甲醇-水)、硅胶制备薄层(甲苯-甲酸乙酯-甲酸)和 Toyopearl HW- 40C (乙醇-水)进行反复色谱分离,得到 8种纯度较高的化合物。蛇菰中含有三萜类、苯