实验六 血清alt活性测定1-课件.ppt

实验六 血清ALT活性测定
一、何谓ALT？
谷丙转氨酶
〔glutamic pyruvic transaminase，GPT〕
丙氨酸氨基转移酶
〔alanine aminotransferase，ALT〕
复****br/>反响式
大多数氨基酸可参与转氨基作用，但赖氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸除外。
二、ALT催化的化学反响:
丙氨酸 +α-***戊二酸 ***酸 + 谷氨酸
ALT
三、ALT的分布:
主要分布于肝、肾细胞、心肌细胞等，血清中的含量很低。
病变时，细胞受损，血清ALT含量升高。
四、ALT测定的临床意义：
作为〔肝脏〕疾病诊断和预后判断的指标之一。
五、测定血清ALT的方法：
King法〔金氏法〕
Reitman法〔赖氏法〕
Mohun法〔穆氏法〕
1981年全国生化检验方法学讨论会确定用赖氏法〔改进〕作为临床首选，单位为：卡门氏单位 。
实验六  血清ALT活性测定 ---改进赖氏法
一、实验性质：分析性
二、目的及要求
1、掌握ALT测定的原理及临床意义
2、熟****测定的操作方法。
丙氨酸 +α-***戊二酸 ***酸 + 谷氨酸
ALT（血清）
基质液
在一定反响条件下 ( ，37℃ ) , 作用 30 min：
三、原理 ：
α-***戊二酸
***酸
+ 2,4 二硝基苯肼
α-***戊二酸-2,4二硝基苯腙
***酸-2,4 二硝基苯腙
两者在 碱性条件下 呈 红棕色 ，等摩尔浓度条件下，***酸 OD 值 大 a-***戊二酸 3倍。
四、试剂：省略
2、按下表操作：
加入物 （ml） 对照管 (B) 测定管 (U)
血清
基质缓冲液 —
混匀，37℃水浴30min（准确记时）
2,4—二硝基苯肼溶液
基质缓冲液 —
混匀，37℃水浴20min；
M NaOH ml，室温放置10 min；
在波长505 nm 处，以蒸馏水校正零点，读取各管吸光
度；根据 (AU--AB) 标准曲线，得到酶活性的卡门氏单位数。
1、将 基质缓冲液 和 血清 在 37℃ 水浴箱
预温5min。
五、操作步骤：