光合细菌分离及培养条件研究报告.doc

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光合细菌M-01的分离及培养条件研究
［摘要］从湛江市霞山区海滩表层污泥中富集分离出红假单胞菌属光合细菌 M-01,对其培养条
件进行了初
步探讨,结果表明：菌株生长温度为 30e时，最适培养光照度为 3 000 lx 。培养基正交实验结 果表明其最优
培养基配方为：氯化铵2 g, g,乙酸钠4 g,碳酸氢钠2 g,氯化钠1 g,酵母膏 g,硫酸镁
g, 储液少量，蒸馏水1 000 mL。其中乙酸钠为最大影响因子。
［关键词］光合细菌(PSB＞。分离。培养。正交实验
光合细菌(Photosynthetic bacteria〉 是一类光合自养型古老细菌 ，具有较强的分解有机物特
性,光合
细菌作为水质净化剂广泛应用于水产动物如一些经济鱼类、虾蟹、贝类的养殖和育苗中
［1~4］。在生产上有
意义的红螺菌科包括红螺菌属、红假单胞菌属和红微菌属 ［4］。现已有学者对红假单胞菌的
分离、鉴定、培
养特性及保藏做了研究［5~7］,但还没有关于其营养条件优化的报道。笔者从海洋环境中分离 到了光合细
菌M-01,采用正交实验方法进行了培养条件优化的研究。现将结果报告如下。
1材料与方法

(1＞待分离材料 取广东省湛江市霞山区海滩表层污泥。
(2＞培养基使用红螺菌科富集培养基作为富集分离基础培养基 ［8］。

(1＞菌株的分离筛选方法 取污泥10 g,装入500 mL细口无色玻璃瓶中，加入富集培养液至满
盖上
瓶盖，隔绝空气，于30e, 3 000 lx 光照下进行富集培养 3~4 d,培养液呈绛红色后，取富集培
养菌液1
mL,转接入培养液中，重复以上操作2次,然后采用改良的Hungate厌氧培养技术 ＞＞＞柱滚管法 ［9］进行
分离纯化，用分离培养基的琼脂柱穿刺培养后保存。
(2＞细胞色素光谱吸收峰值测定方法 培养物离心后洗涤，将细胞悬浮于 60%勺蔗糖溶液中，采
用
722S分光光度计扫描，波长范围为340~1 000 nm。
(3＞生长量的测定 为比较不同培养条件下(光照、接种量、营养条件 ＞培养物生长量的差别，
采用
722S分光光度计检测培养物 D660 nm值。
(4＞光照度对菌株生长影响的测定 将已接种的光合细菌培养液于温度 30e,光照度分别为 2
000、
3 000、4 000、5 000、6 000 lx 下培养3 d,每组3管，用722S分光光度计测定培养物菌液 光密度D660 nm(用
培养初刚接种的培养液为空白对照 >。
(5>酵母膏添加量对菌株生长影响的测定 在培养液中分别加入酵母膏 ，令其质量分数分别为
0100、
0105、0110、0115、0120、0125、0130 g/L。
(6>培养基正交实验 根据预备实验，设计5因子4水平的正交实验(表1>,在温度30e,3 000
lx光
照条件下进行培养基的正交实验。
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长江大学学报(自科版>2005年8月第2卷第8期/农学卷第25卷第3期
Journa