斑马鱼石蜡组织切片技术的优化.docx


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文档介绍
斑马鱼石蜡组织切片技术的优化
 
 
刘承英 赵燕 刘娟
摘  要:为优化斑马鱼(Danio rerio)石蜡切片制作技术,以斑马鱼心、肠、肝脏为材料,研究了斑马鱼石蜡组织的切片制作方法,并采集图像进行分析。结果表明,改进后的实验方法能够制作出高质量的斑马鱼石蜡组织切片。
关键词:斑马鱼;石蜡切片;苏木精-伊红染色;心脏
中图分类号 Q95-3   文獻标识码 A   文章编号 1007-7731(2019)09-0067-2
Abstract:To optimize the paraffin slicing technology of zebrafish (Danio rerio),Using zebrafish heart,intestine and liver as materials,the method of making paraffin tissue sections of zebrafish was studied,and image analysis was collected.The results showed the improved experimental method can produce high quality paraffin tissue sections of zebrafish.
Keywords:Zebrafish;Paraffin section;Hematoxylin-eosin staining;Heart
斑马鱼(Danio rerio)又名蓝条鱼、花条鱼、斑马担尼鱼,隶属辐鳍亚纲鲤科短担尼鱼属,是一种重要的脊椎动物模型,广泛应用于发育生物学、遗传学以及毒理学等多个研究领域[1-2]。目前,国内外关于斑马鱼正常组织结构的研究还较少,主要是关于斑马鱼端脑、中脑和肠道的组织结构的研究[3-5],因而斑马鱼的组织结构基础资料亟待完善。
石蜡组织切片能够清晰显示组织细胞的形态结构,提供基础组织的形态学资料[6]。但是石蜡切片的制作步骤繁杂,影响因素多,因而摸索出一套制作高质量斑马鱼石蜡切片的方法尤为重要。本实验以斑马鱼心、肠和肝脏为实验材料,拟从浸蜡和染色步骤着手改进斑马鱼石蜡切片制作技术,以期为斑马鱼的组织学研究提供理论依据。
1 材料
1.1 实验材料 健康成年斑马鱼15尾,体长平均为(3.0±0.2)cm。
1.2 试剂与仪器 苏木精(南京奥多福尼生物科技有限公司),伊红(Y水溶,天津市大茂化学试剂厂),乙醇(分析纯,南京华嘉化学试剂有限公司),二甲苯(分析纯,广州迪鑫多科学仪器有限公司)。2508型切片机(上海珂淮仪器有限公司),徕卡体视显微镜、徕卡DMI3000B型倒置荧光显微镜(上海立光精密仪器有限公司)。溶液配方:埃利希(Ehrlich)苏木精(苏木精1.0g、十二水硫酸铝钾2.5g、甘油50mL、无水酒精50mL、蒸馏水50mL、冰醋酸5mL);磷钨酸苏木精(苏木精0.1g,磷钨酸2g,蒸馏水100mL);中性甲醛溶液(40%甲醛50mL、无水磷酸氢二钠3.25g、磷酸二氢钠2.0g、蒸馏水450mL)。
2 实验方法
2.1 取材 迅速在体视显微镜下解剖斑马鱼,取出器官后生理盐水清洗2~3次,然后在中性甲醛溶液固定约24h。
2.
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  • 上传人科技星球
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  • 时间2021-11-28