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第八章
分子杂交技术
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第一节 分子杂交的原理
核酸分子杂交（nucleic acid hybridization）
指具有互补序列的两条核酸单链在一定条件下按碱基配对原则形成双链的过程。
分子杂交是通过配对碱基对之间的非共价键（主要是氢键）结合，从而形成稳定的双链区。杂交分子的形成并不要求两条单链的碱基顺序完全互补，所以不同来源的核酸单链只要彼此之间有一定程度的互补顺序（即某种程度的同源性）就可以形成杂交双链
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精品资料
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你怎么称呼老师？
如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你是否会认为老师的教学方法需要改进？
你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？
教师的教鞭
“不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
“太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
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不同来源的DNA或RNA单链在一定条件下重新组成的新的双链分子——杂交分子
若所用的核酸探针的片段较长(几百个核苷酸以上)，可以得到很准确的鉴定结果。但若人工合成的寡核苷酸探针片段较短（如20～30个核苷酸），则难免会出现准确性差的假阳性现象。
杂交的双方是待测核酸和已知核酸序列，已知核酸序列称探针。
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杂交的双方：探针和要检测的核酸。
将核酸分子固定在固相支持物上，然后用标记的探针和被固定的分子杂交，经显影后显示出目的DNA或RNA分子所处的位置。
被检测的核酸：
克隆化的基因组DNA 提纯的
细胞总DNA 细胞内杂交（细胞原位杂交）
细胞总RNA
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变性
复性
DNA-DNA
杂交双链分子
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杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。
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一、DNA变性与复性
（一）DNA变性
1、定义：某些理化因素导致两条DNA链间的氢链断裂变为单链的过程，称DNA变性
2、变性的方法：
（1）热变性：温度升高到90~100℃时，双链核酸 分子链间的氢键完全断裂。
（2）酸碱变性：pH值低于3或高于10时，双链核酸分子链 间的氢键断裂。
（3）化学试剂变性：如尿素、甲酰***、甲醛等使 双链核酸分子链间的氢键断裂。
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GC含量与Tm值之间的关系
（G+C）%=（Tm-) ×
Tm =(G+C)%×+
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