高二生物选修基因工程ppt.ppt

高二生物选修基因工程ppt
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识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。能将外来的DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶。
4000种。
1、来源：
2、种类：
3、作用：
4、结果：
形成两种末端
一、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶
粘性末端
平末端
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二、 “分子缝合针” —— DNA连接酶
1、种类：
2、作用部位：
两类
E·coli DNA连接酶
T4 DNA连接酶
磷酸二酯键
DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，即把梯子两边扶手的断口连接起来，这样一个重组的DNA分子就形成了。
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“分子缝合针”——DNA连接酶
1、作用：恢复被限制性内切酶切开了的两个
的两个核苷酸之间的磷酸二酯键
2、分类：从大肠杆菌中分离得到
从T4噬菌体分离得到
3、区别：
T4既能连接黏性末端，又可以连接
平末端（效率低）
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“分子运输车”——基因进入细胞的载体
1、常用载体：质粒、λ噬菌体衍生物、动植物病毒
2、质粒：最常用的载体
是一种裸露的、结构简单、独立于拟核
之外、并具有自我复制能力的双链DNA
分子
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质粒作为
载体的条件:
能在宿主细胞内复制并稳定
的遗传
具有多个限制酶切点
具有某些遗传标记基因（标记基因）
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基因工程的基本操作程序主要包括
四个基本步骤：
1）目的基因的获取
2）基因表达载体的构建
3）将目的基因导入受体细胞
4）目的基因的检测与鉴定
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过程
优点
缺点
直接分离法
（鸟枪法）
供体细胞DNA →DN***段→不同受体细胞→DN***段扩增→目的基因细胞→目的基因
操作简便
工作量大，有盲目性，目的基因含有不表达的内含子
反转录法
mRNA →单链DNA →双链DNA
专一性强，目的基因不含内含子
操作过程麻烦，mRNA生存时间短，技术要求高
据已知的氨基酸序列合成
氨基酸序列 mRNA
双链DNA
专一性最强，目的基因不含 内含子
目前复杂的尚不知的核苷酸序列不能合成
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