酶的特性实验.ppt

实验十:酶的特性?实验目的: 加深对酶的性质的认识。?实验内容: 对酶活力的影响 ?一、原理: 酶的催化作用受温度的影响,在最适温度下,酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为 37- 40℃,植物酶的最适温度为 50-60℃。酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂,虽加热到 100 ℃,其活性并无明显改变, 但在 100 ℃的溶液中却很快地完全失去活性。低温能降低或抑制酶的活性,但不能使酶失活。?二、器材: 1)试管及试管架 2)恒温水浴 3)冰浴 4)沸水浴?三、试剂和材料: 1) ﹪淀粉的 %NaCl 溶液 150 ml,需新鲜配制 2)稀释 200 倍的唾液 50 ml :用蒸馏水漱口,以清除事物残渣,再含一口蒸馏水,半分钟后使其流入量筒并稀释 200 倍,混匀备用。 3) KI -碘溶液 50 ml :将 KI20g 及碘 10g溶于 100 ml 水中。使用前稀释 10倍。?四、操作方法: 淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小,遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色,麦芽糖遇碘也不呈色。在不同温度下,淀粉被唾液淀粉酶水解的程度,可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。取三支试管,编号后按下表加入试剂: - - - 煮沸过的稀释唾液( ml )- 11 稀释唾液( ml ) 淀粉溶液( ml )321 管号?摇匀后,将 1号、 3号两试管放入 37 ℃恒温水浴中, 2号试管放入冰中, 10min 后去处,(将 2号管内液体分为两半)用 KI-碘溶液来检验 1、2、3管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结果,将 2号管剩下的一半溶液放入 37℃水浴中继续保温 10min 后,再用碘液实验,结果如何? pH 对酶活性的影响?一、原理酶的活力受环境 pH 的影响极为显著。不同酶的最适 pH 值不同。本实验观察 pH 对唾液淀粉酶活性的影响,唾液淀粉酶的最适 pH 约为 。?二、器材 1)试管及试管架 2)吸管 3)滴管 4)50 ml 锥形瓶 5)恒温水浴?三、试剂和材料 1)新配制的溶于 % NaCl %淀粉溶液 250 ml 2)稀释 200 倍的新鲜唾液 100 ml 3) 磷酸氢二钠溶液 600 ml 4) 柠檬酸溶液 400 ml 5) KI -碘溶液 50 ml 6) pH 试纸: pH=5 、 pH= 、 pH= 、 pH=8 四种?四、操作方法: 取四个标有号码的 50 ml 锥形瓶。 mol/L 磷酸氢二钠溶液和 柠檬酸溶液以制备 - 的四种缓冲液。从四个锥形瓶中各取缓冲液 3 ml ,分别注入 4支带有号码的试管中,随后于每个试管中添加 %淀粉溶液 2 ml 和稀释 200 倍的唾液 2 ml 。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔各为 1 min 。将各试管内容物混匀, 并依次置于 37 ℃恒温水浴中保温。第四管加入唾液 2 min 后,每隔 1 min 由第 3管取出一滴混和液,置于白瓷板上,加 1小滴 KI -碘溶液,检验淀粉的水解程度。待混和液变为棕黄色时,向所有试管依次添加 1-2滴 KI -碘溶液。添加 KI -碘溶液的时间间隔从第一管起,亦均为 1 min 。观察各试管内容物呈现的颜色,分析 pH 对唾液淀粉酶活性的影响。 4 2 1 pH mol/L 柠檬酸( ml ) mol/L 磷酸氢二钠( ml ) 锥形瓶号码唾液淀粉酶的活化和抑制?一、原理酶的活性受活化剂或抑制剂的影响。***离子为唾液淀粉酶的活化剂,铜离子为其抑制剂。?二、器材: 1)恒温水浴 2)试管及试管架?三、试剂和材料: 1) %的淀粉溶液 150 ml 2)稀释 200 倍的新鲜唾液 150 ml 3)1% NaCl 溶液