试述电子显微镜概况.doc

一、试述电子显微镜概况
答题关键点：
1．透射电镜（TEM）
透射电镜即透射电子显微镜（Transmission Electron Microscope，简称TEM），通常称作电子显微镜或电镜（EM），是使用最为广泛一类电镜。它关键特点是利用电子射线（或称电子束也称电子波）穿透样品，以后经多级电子放大后成像于荧光屏。它关键优点是分辨率高，可用来观察组织和细胞内部超微结构和微生物和生物大分子全貌，在生命科学领域中应用最为广泛。依据加速电压大小，又可将TEM分为通常TEM（加速电压小于120KV）、高压TEM（加速电压在120KV～500KV之间）和超高压TEM（加速电压大于500KV）。
1）通常TEM。最常见是100KV电镜。这种电镜分辨率高（，），但穿透本事小，观察样品必需很薄，约为30～100nm，如细胞和组织超薄切片、复型膜和负染样品等。这种电镜在生命科学领域中应用已相当普及。
2）高压TEM。现在常见是200KV电镜。，能够在观察较厚样品时取得很好分辨本事，从而能够对细胞结构进行三维观察。
3）超高压TEM。现在已经有500KV、1000KV和3000KV超高压TEM。这类电镜含有穿透本事强、辐射损伤小、能够配置环境样品室及进行多种动态观察等优点，分辨率也已达成或超出100KV电镜水平。在超高压电镜上附加充气样品室，使大家能够观察活细胞内超微结构动态改变。
2．扫描电镜（SEM）
扫描电镜即扫描电子显微镜（Scanning Electron Microscope，简称SEM），其关键是利用电子射线轰击样品表面，引发二次电子等信号发射，经检测装置接收后成像一类电镜。其特点是景深长，所取得图像立体感强，可用来观察生物样品多种形貌特征。在生命科学研究中，采取不一样样品制备技术可观察不一样结构，如用临界点干燥法可观察样品表面形貌；用冷冻割裂方法可观察样品割裂面结构；用铸型方法可观察管腔内表面结构等。
1）通常SEM。现在通常扫描电镜采取热发射电子枪，分辨率为6nm左右，若采取六硼化镧电子枪，分辨率可提升到4～5nm。这种电镜在生命科学领域中应用也已相当普及。
2）场发射电子枪SEM。因为场发射电子枪含有亮度高、能量分散少，阴极源尺寸小等优点，这种电镜分辨率已达成
3nm。场发射电子枪SEM另一个优点是能够在低加速电压下进行高分辨率观察，所以能够直接观察绝缘体而不发生充、放电现象。
3）生物用SEM。这种SEM备有冰冻冷热样品台，可把含水生物样品快速冷冻并对冰冻样品进行观察，能够降低化学处理引发人为改变，使观察样品更靠近于自然状态。如要观察内部结构，还可用冷刀把样品进行切开，加温使冰升华，并在其上喷镀一层金属再进行观察，全部这些过程全部在SEM中不破坏真空状态下进行。
3．电子探针
电子探针关键用于探测微小区域元素成份。其原义仅是一个物理学名词，意指聚焦了电子束。当电子束照射样品表面时，可激发X射线，X射线光量子能量及波长和元素原子序数相关，称为特征X射线。采取晶体分光光谱法测定X射线波长和强度来分析样品成份仪器，称为X射线分光光谱仪或电子探针；用锂漂移硅探头测定X射线能量和强