补充2-蛋白质理化性质.ppt

第五章
蛋白质的通性、纯化和表征
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≤目的要求≥
1、掌握蛋白质的***电离、胶体、沉淀的性质。
2、熟悉蛋白质分离纯化的一般原则，掌握蛋白质分离纯化方法。
3、掌握蛋白质的含量测定与纯度鉴定。
≤重点难点≥
1、蛋白质的***电离、胶体、沉淀的性质。
2、蛋白质的分离纯化方法。
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一、蛋白质的酸碱性质
1. 蛋白质分子的可解离基团
2. 等电点：使蛋白质分子所带的正电荷与负电荷恰好相等，净电荷为零的溶液pH。（与AA相同）
蛋白质分子除两端的氨基和羧基可解离外，氨基酸残基侧链中某些基团，在一定的溶液pH条件下都可解离成带负电荷或正电荷的基团。
蛋白质所带电荷性质取决于可解离基团的种类和数目以及溶液的pH。
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每种蛋白质都有特定的等电点，这是鉴别蛋白质的指标之一。
蛋白质的酸性氨基酸和碱性氨基酸含量与等电点的关系:
等电点和蛋白质分子中所含氨基酸的种类和数目有关。
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3. 等离子点
蛋白质的等电点在有中性盐（Ca2+，Mg2+，Cl-，SO42-）存在下可以发生明显的变化。
等离子点：蛋白质在没有其它盐类干扰的纯水中，蛋白质质子供体基团解离出来的质子数与质子受体基团结合的质子数相等时的溶液的pH值。
等离子点是一个特征常数
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二 蛋白质的胶体性质与蛋白质的沉淀
蛋白质溶液中，蛋白质分子的直径介于1～100nm，该分散系统为胶体溶液系统。布郎运动、丁道尔现象、不能透过半透膜）。
胶体系统保持稳定的三个因素
颗粒大小在1～100nm范围内
颗粒表面带有同种净电荷
与水形成水化层
（一）胶体性质
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当破坏了维持蛋白质胶体稳定的因素甚至蛋白质的构象时，蛋白质就会从溶液中析出的现象称为蛋白质的沉淀。
应用:
(1)蛋白质分离纯化
(2)解毒
(3)临床检验
（二）蛋白质的沉淀
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引起蛋白质沉淀的原因
1、加入脱水剂以除去它的水化层。
2、改变溶液的pH达到蛋白质的等电点使质点失去携带相同净电荷。
3、加入电解质破坏双电层，蛋白质分子就会凝集成大的质点而沉淀。
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带正电荷的蛋白质
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带负电荷的蛋白质
在等电点的蛋白质
水化层
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带正电荷的蛋白质
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带负电荷的蛋白质
不稳定的蛋白质颗粒
酸
碱
酸
碱
酸
碱
脱水作用
脱水作用
脱水作用
蛋白质的聚沉
蛋白质胶体溶液沉淀作用示意图
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