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实验四-酶的特性实验
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说明：本实验由四个小实验组成，其中第一个实验（酶的专一性）必做，其他三个小实验选做（至少做一个）
写实验报告时，可以只写需要做的实验内容！
实验四 酶的特性实验
一、实验目的
酶是生物催化剂，生物体内化学反应基本上都是在酶的催化下进行的。通过本实验了解酶催化的特异性、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响，对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。
二、实验内容
本实验由酶的专一性实验、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响4个小实验组成。
（一）酶的专一性
1、实验原理
本实验以唾液淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用为例，来说明酶的专一性。淀粉和蔗糖无还原性，唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性二糖的麦芽糖，但不能催化蔗糖的水解。用班氏试剂检查糖的还原性。班氏试剂为碱性硫酸铜，能氧化具还原性的糖，生成砖红色沉淀氧化亚铜。
2、材料、仪器与试剂
(1)材料：新鲜配制的唾液及其稀释液
(2)仪器：恒温水浴；沸水浴；试管及试管架；
(3)试剂：2%蔗糖溶液；% %淀粉溶液；班氏试剂。
3、实验操作
（1）稀释唾液的制备
①唾液的获取
用一次性杯取一定量的饮用水，漱口以清洁口腔，然后在嘴中含10-20ml饮用水，轻漱2min左右时间，即可获得唾液的原液，内含唾液淀粉酶。
②不同稀释度唾液的制备（用大试管）
本实验需制备1：1、1：5、1：20、1：50、1：200等五个不同浓度的稀释唾液。
举例说明：1:5指的是稀释了5倍的唾液，制备方法为1份原液+4份蒸馏水。
1：20指的是稀释了20倍的唾液，制备方法为1份1：5的稀释液+3分蒸馏水。
（2）唾液淀粉酶最佳稀释度的确定（严格按表
（2）仪器：试管及试管架；恒温水浴；冰浴；沸水浴；
（3）试剂：% %淀粉溶液；KI－I2碘溶液；
3、实验操作
取4支干燥的试管，编号后按下表加入试剂：
表3 温度对酶活力影响实验加样顺序
管号
1
2
3
%淀粉溶液（ml）



最佳稀释度唾液（ml）
1
1
 
煮沸过的稀释唾液（ml）
 
 
1
实验结果
摇匀后，将1、3号试管放入37℃恒温水浴中，2号试管放入冰水中。10分钟后1、2、3管均取出（将2号内液体分两半），用KI－I2溶液来检验1、2、3号管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结果。将2号管剩下的一半溶液放入
37℃水浴中继续保温10分钟后，再用KI－I2液实验，记录实验结果。
（三）PH对酶活力的影响
1、实验原理
酶的活力受环境PH值的影响极为显著。不同酶的最适PH不同。本实验观察PH对唾液淀粉酶活性的影响。。
2、材料、仪器与试剂
（1）材料：%%淀粉溶液
（2）仪器：试管及试管架；吸管；滴管；恒温水浴
（3）试剂：、、、；KI－I2碘溶液；PH试纸
3、实验操作
表4 PH对酶活性的影响实验
PH
5
5．8
6．8

缓冲液（ml）
3
3
3
3
%淀粉溶液（ml）
1
1
1
1
向第一个试管加入稀释唾液后，置于37℃的恒温水浴；等待1min后
向第二个试管加入稀释唾液，置于37℃的恒温水浴；依次类推！
最佳稀释度的唾液（ml）
1
1
1
1
检查淀粉水解程度
待向第四只试管加入唾液2min后，每隔1分钟从第3管中取出1滴反应液于白瓷板上，加碘液检查反应进行情况，直至反应液变为淡棕黄色（颜色有点淡即可）。即可从第一只试管依次添加碘液，时间间隔也为1min。
碘液(滴)
1～２
1～２
1～２
1～2
现象
为了更好的理解表格内容，下面对实验过程进行说明：
各取缓冲液3ml，分别注入4支带有号码的试管，%淀粉溶液1ml和最佳稀释度的唾液1ml。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔为1分钟。将各试管中物质混匀，，并依次置于37℃恒温水浴中保温。
待向第4管加入唾液2ml后，每隔1分钟由第3管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1小滴KI－I2溶液。添加KI－I2溶液，检验淀粉的水解程度。待混合变为淡棕黄色（颜色有点淡即可）后，向所有试管依次添加1-2滴KI－I2溶液。添加滴KI－I2溶液的时间间隔，从第1管起，亦均为