医学细胞生物学实验.ppt

医学细胞生物学实验
教师:李学英、杨明理
联系方式:8609692
实验课要求
预****br/> 穿白大衣并扣好
认真操作
爱护仪器
保持卫生
保持安静
实验完成后:
1、将动物尸体扔到门口动物垃圾桶中;集中
送到动物中心焚烧;
2、清洗并检查自己桌面上的器材(弯盘、镊
子等);
3、做好显微镜使用登记,盖好防尘罩;
4、将用过的载玻片刷洗干净后放入回收盆中;
5、盖玻片、吸水纸等扔到垃圾桶中。
本学期实验进度安排
细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的原位显示
细胞内DNA和RNA的原位显示
线粒体的观察
细胞膜的通透性观察
小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察
细胞内过氧化物酶的原位显示
细胞有丝分裂的观察
设计型实验报告指导
动物细胞融合
细胞核的分离与鉴定
小白鼠骨髓细胞染色体标本的制备
第一次
(验证型)
第二次
(验证型)
第三次
(验证型)
第四次
(设计型)
第五次
(设计型)
第六次
(验证型)
P28
P28
P23
P42
P46
P28
P56
P34
P38
P78
第一次实验
Ⅰ细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的原位显示
Ⅱ细胞内DNA和RNA的原位显示
Ⅲ线粒体的观察
显示细胞内化学组分和细胞器应选用什么技术
细胞化学法(cytochemical methods)
在保持细胞结构的基础上,利用某些化学物质与细胞内某种成分发生化学反应,在局部范围形成有色沉淀的原理,对细胞的化学成分进行定性、定位和定量的研究。
细胞结构
化学反应
有色
沉淀
定性、定位和定
量
Ⅰ细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的原位显示
[实验目的]
1、掌握酸、碱性蛋白在细胞内的分布情况;
2、了解酸、碱性蛋白显色反应的一般原理和方法。
[实验原理]
由于不同蛋白质分子所带酸性基团和碱性基团数量不同,生理条件下,整个蛋白质带负电荷多则为酸性蛋白,带正电荷多则为碱性蛋白。可用不同pH值的固绿染色,即可显示细胞内酸性蛋白或碱性蛋白。
三***醋酸可抽提掉核酸,避免影响实验结果
[操作流程]
制血涂片
晾干
5min
95%乙醇
固定
晾干
90℃三***醋酸
20min
抽提
流水冲洗
晾干
染色
冲洗、晾干
镜检
蟾蜍
双毁髓法
处死
20min
%碱性固绿
心脏血
5min
%酸性固绿
染色
冲洗、晾干
镜检