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分光光度计计量检定过程分析与评定.doc


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分光光度计计量检定过程分析与评定.doc分光光度计计量检定过程分析与评定摘要: 目的通过分析分光光度计检定中的各种因素, 评估分光光度计检定结果的正误。方法计算检测装置的不确定度、稳定性、重复性, 评估分光光度计检定结果的正误。结果经过分析被检仪器设置和标准装置的不确定度、稳定性、重复性对检定的影响, 排除了检定中影响检定结果的各种因素。结论经过分析和评定,注意设置被检仪器,检定装置满足量传要求,按照规程操作可以确保分光光度计的量值准确可靠。关键词:分光光度计;检定;不确定度;重复性分光光度计是医院实验室常用的分析仪器, 主要功能是对物质进行定量、定性的分析,常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量[1] 。通常使用氧化钬滤光片, 通过全波段扫描, 找到其吸光度出现波谷的波长, 然后与定值进行比较, 可得到波长示值误差的数值。其工作原理是采用可以产生多个波长的光源, 通过分光装置, 产生特定波长的光源, 光源透过测试样品后, 部分光源被吸收, 计算样品的吸光值, 最终转化成样品的浓度,根据计算规律样品的吸光值与样品的浓度成正比[2] 。 1 测量标准概述 测量标准的组成检测波长采用低压***灯波长标准器、 H849 氧化钬滤光片一块、 P749 镨钕滤光片一块、 G693 干涉滤光片三块、 W062 近红外滤光片五块; 检测透射比采用三块 Z741 可见光透射比滤光片、三块 J56 6 紫外光透射比滤光片;检测杂散辐射率采用三块 ZA1105 杂散光滤光片。 方法采用低压***灯波长标准器、氧化钬滤光片、镨钕滤光片检定波长; 采用金属石英滤光片检定透射比准确度与重复性, 采用杂散光滤光片检定杂散辐射率[3] 。将标准物质垂直放入被检仪器的样品光路中, 读取标准物质的光度测量值, 使用***灯时, 将***灯置于光源室, 使***灯的光入射到单色器入射夹缝, 选择能量测量方式, 测量能量最大时对应的峰值波长, 检定被检仪器的波长准确度及重复性。 2 检定中应注意的问题 仪器性能判断在 JJG178-2007 《紫外、可见、近红外分光光度计》检定规程中, 为了便于描述仪器的计量性能要求, 将仪器的工作波长分为 A 段( 190nm ~ 340nm )、B 段( 340nm ~ 900nm )和 C 段( 900nm ~ 2600nm ), 并把仪器性能从高到低划分为 I级、I级、 II级、 IV级,共4 个级别[4] 。因此在检定证书中应给出每项指标在每个波段的仪器级别, 以方便使用者对仪器性能的判断。 基线平直度检定基线平直度是指扫描透射比为 100和0 时基线倾斜或弯曲的程度。如果基线平直度差,会使吸收峰之间的比值发生变化, 给仪器定性分析造成困难。导致基线平直度差的主要原因是光学系统失调, 两光束不平衡, 而仪器受震动、光源位置变动都会引起光学系统故障[5] 。因此在测量时要让仪器充分预热, 并设置仪器光谱带宽为 2nm , 并且在仪器遮光罩关闭后稳定 2min 后再进行波长扫描。 调整光谱带宽检测噪声、漂移、最小光谱带宽和基线平直度时需要调整光谱带宽。光栅型仪器中当狭缝宽度小于衍射宽度时, 光谱带宽由衍射宽度决定;当狭缝宽度大于衍射宽度时,光谱带宽由狭缝宽度决定, 狭缝越小, 得到的单色光越纯, 但光的强度降低了。目前, 有很多仪器为固定光谱带宽,容易使光电流的噪

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  • 上传人kisuamd347
  • 文件大小26 KB
  • 时间2016-08-07