毕业论文——载体构建.docx


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文档介绍
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目录
摘要 - 1 -
1.前言 -3 -
研究背景 - 6 -
User fusion 技术简介 - 5 -
2.实验材料和方法 - 7 -
SUR1启动子的克隆 - 7 -
转化农杆菌 - 9 -
2.3农杆菌侵染法侵染拟南芥 - 9 -
Basta筛选转基因拟南芥 - 11 -
3.结果 - 11 -
SUR1启动子User fusion克隆结果 - 11 -
启动子PCR产物与载体连接 - 13 -
大肠杆菌中SUR1启动子菌落PCR检测结果 - 14 -
3.4 SUR1启动子农杆菌的PCR检测 - 15 -
3.5 Basta筛选结果 - 16 -
4.讨论 - 18 -
参考文献 - 19 -
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致谢 - 20 -
摘要:
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芥子油苷是一类十字花科植物所特有的硫代产物,芥子油苷代谢与植物防御反响密切相关,且某些芥子油苷的降解产物具有很高的抗肿瘤活性,因而其代谢与调控机制的研究备受关注。随着生物信息学的开展以与芥子油苷合成途径中相关基因的鉴定,SUR1基因参与硫苷生物合成模式三个阶段中硫苷核心结构的形成阶段,SUR1表达的C-S lyase SUR1 能将 S-烷基硫代烷肟转换成硫代肟基酸。本研究以模式植物拟南芥为实验材料。采用USER fusion,构建载体,农杆菌转化,GUS染色等方式,观察其表达模式,完成其组织定位,结果用以和其他的芥子油苷合成路径中的一些相关的基因进展表达上的比照,通过这中方式探讨SUR1基因在芥子油苷的合成途径中的功能意义,以与SUR1基因时空表达的特异性。
关键词:
芥子油苷,拟南芥,SUR1 ,USER fusion
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Abstract: is a class of sulfur-containing secondary metabolism outes specialized in Cruciferous plants. Glucosinolates have an important role in plant defense and some of the glucosinolates degradation products can prevent cancer in humans. Today, the researching about the glucosinolates metabolism and its biosynthesis regulation is under the spotlight. Along the development of bioinformatics and the demonstration of the new genes which involve the biosynthesize of glucosinolates,,SUR1 take part in the process Constructing the glucosinolate core,which can happen non-enzymatically, the produced S-alkylthiohydroximatesare converted to thiohydroximates by theC-S lyase SUR1。In this study,we use the model plant Arabidopsis as experimental material,USER fusionconstruct vectors, Agrobacterium-mediated transformation,GUS ,to observe expression pattern and plete its tissue localization.the results are usedand some other known mustard oil glycoside synthesisroute related gene expressioncontrast.the functional
significance of the SUR1 gene in the biosynthesis ofglucosinolates this way SUR1 gene temporal a
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